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第六章 微生物的遗传与变异 教学目的与要求 了解DNA分子的结构与复制和微生物的突变类型。 掌握污泥驯化的原理与方法。 了解遗传工程技术在环境保护中的应用。 第一节 微生物的遗传 一、遗传与变异的物质基础——DNA 二、DNA的结构与复制 三、DNA的变形与复性 四、RNA 五、微生物的生长与蛋白质合成 六、微生物的细胞分裂 一、 遗传与变异的物质基础——DNA 格里菲斯(Griffith)经典的转化实验 实验材料：肺炎双球菌 转化实验S型菌细胞抽提液试验 噬菌体感染实验 原理：DNA只含P不含S； 　　　 蛋白质只含S不含P 步骤： 1：用含同位素 35S 、 32P的培养基培养大肠杆菌； 2：让T2感染上述大肠杆菌使其带有35S 、 32P标记； 结果：上清液中含15%放射击性；沉淀中含85%放射性 植物病毒的重建实验 原理：植物病毒蛋白质和RNA可以人为地分开，同时又可把它们重新组合成具感染性的病毒。 甲RNA＋乙Pr → 感染症状同甲病毒；分离得到甲病毒 乙RNA＋甲Pr → 感染症状同乙病毒；分离得到乙病毒 二、 DNA的结构与复制 DNA的化学结构（3） 遗传物质在微生物细胞内的存在部位和方式 DNA就是脱氧核糖核酸（长链） 基 因是 一 段 DNA 大 肠 杆 菌 基 因 组 4100个基因，4.7×106bp 遗传信息的连续性 功能相关的结构基因组成操纵子 结构基因单拷贝及rRNA多拷贝 基因的重复序列少而短 原核生物基因调控 乳 糖 操 纵 子 五、 微生物的生长与蛋白质合成 蛋白质合成的过程 1 DNA的复制 2 转录mRNA 3 翻译 4 蛋白质的合成 基因的转录和翻译 第二节 微生物的变异 一、变异的实质——基因突变 二、突变的类型 一、变异的实质——基因突变 DNA序列范围的改变从单个碱基改变通常称为点突变(point mutations)，到基因组大范围的重排，有时称为多位点突变，其中包括DNA链上短的一段序列或长的一段序列改变，从而影响许多基因。 多位点突变可以是碱基序列的缺失、插入、倒位、置换(包括易位)和重复以及在基因组中发生重组或转座的结果。 点突变中由一个嘌呤变为另一个嘌呤(A?G)或一个嘧啶变为另一个嘧啶(C?T)称为转换(transition)，嘌呤变为嘧和嘧啶变为嘌呤称为颠换(transversions)。遗传型上一个碱基的改变在表型上的效应取决于突变的性质和在基因组点突变发生的位置，有四种点突变类型： 3、突变的类型 （1）自发突变： 多因素低剂量的诱变效应 互变异构效应 （2）诱发突变： 物理诱变因子：紫外辐射、X—射线、 β—射线、快中子、γ—射线和激光等。 化学诱变因子： 生物诱变因子：某些病毒 第三节 微生物基因的转移和重组 基因转移(gene transfer)：外源性的遗传物质由供体菌进入某受体菌细胞内的过程。 基因重组(recombination)：转移的基因与受体菌DNA整合在一起，使受体菌获得供体菌某些特性。 外源性遗传物质：供体菌染色体DNA，质粒DNA及噬菌体基因等。 细菌的基因转移和重组方式：转化、接合、转导、溶原性转换、细胞融合。 格里菲斯(Griffith)经典的转化实验 三、转 导 (Transduction) 第四节 遗传工程技术在环境保护中的应用 一、遗传工程技术在环境保护中的应用 二、基因工程技术在环境保护中的应用 三、PCR技术在环境保护中的应用 PCR（polymerase chain reaction）称DNA多聚酶链式反应。由Millus于1985年创立，是一种在DNA体外扩增的技术。聚合酶链式反应也可以当作一项极其重要的酶促合成DNA技术。PCR又称为无细胞克隆系统或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的一次重大革新，它可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍。 基因突变及修复 一、基因突变 (一)基因突变的机制 (二)突变株的筛选 (一）基因突变的机制 1、基因突变(gene mutation) 一个基因内部结构或DNA序列的任何改变，改变一对或少数几对碱基的缺失、插入或置换，而导致的遗传变化称为基因突变。 2、点突变(point mutations) 1）同义突变(same-sense mutations) 由于基因密码的冗余[性]；同样的氨基酸插入蛋白质，结果表型上没有看出变化。 2）错义突变(mis-sense mutations) 指不同的氨基酸插入蛋白质的多肽链中，多肽链相应氨基酸改变的结果视蛋白质的基本部分或非基本部分改变而定。前者蛋白质功能改变或丧失，后者表型上没有观察到变化。 3）无义突变(nonsense