2017-2018学年高中生物 基因工程 1.2 基因工程的基本操作程序 新人教版选修3.pptVIP

1.2　基因工程的基本操作程序 1.简述基因工程的原理及基本操作程序。 2.能根据基因工程的操作程序设计出某一转基因生物的研制过程。 一 二 三 四 一、目的基因的获取 1.从基因文库中获取目的基因 将含有某种生物不同基因的许多DNA片段导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。 基因文库包括两种:基因组文库,即包含一种生物所有基因的文库;部分基因文库,即只包含一种生物的一部分基因的文库,如cDNA文库。 一 二 三 四 2.利用PCR技术扩增目的基因 (1)PCR的含义:一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。 (2)目的:短时间内大量扩增目的基因。 (3)原理:DNA双链复制。 (4)过程 第一步,加热至90~95 ℃,DNA解链为单链。 第二步,冷却至55~60 ℃,引物与两条单链DNA相应互补序列结合。 第三步,加热至70~75 ℃,热稳定DNA聚合酶(Taq酶)从引物起始进行互补链的合成。 如此重复循环多次。 (5)特点:指数形式扩增。 一 二 三 四 3.用化学方法人工合成 如果基因比较小,核苷酸序列又已知,也可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。 一 二 三 四 二、基因表达载体的构建 基因表达载体的组成:必须有启动子、目的基因、终止子以及标记基因等。 1.启动子 启动子是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端