异军突起的冷冻电镜技术.PDF

科技导报2017，35（23） 异军突起的冷冻电镜技术异军突起的冷冻电镜技术 ———度诺贝尔化学奖成果简析年度诺贝尔化学奖成果简析 雷建林 清华大学生命科学学院，北京100084 摘要摘要 2017年诺贝尔化学奖授予JacquesDubochet、JoachimFrank和RichardHenderson3位科学家，以表彰他们在开发用 于溶液中生物分子高分辨率结构测定的冷冻电镜技术方面的贡献。本文将简述这3位科学家的获奖工作，并展望冷冻电镜技术 的发展前景。 关键词关键词 2017年诺贝尔化学奖；冷冻电镜；生物大分子结构 2017年10月4 日，瑞典皇家科学院宣布2017年度诺贝尔 raycrystallography）、核磁共振（nuclearmagneticresonance， 化学奖授予对冷冻电镜技术发展做出原创性贡献的3位科学 NMR）和冷冻电镜（cryo-electronmicroscopy，Cryo-EM）三维 家，他们分别是瑞士洛桑大学的退休荣誉教授JacquesDubo⁃ 重构（three-dimensionalreconstruction，3DEM）是结构生物学 chet、美国哥伦比亚大学的JoachimFrank教授和英国剑桥 的3大研究技术。X射线晶体学和核磁共振技术都有着先天 MRC分子生物学实验室的RichardHenderson教授（图1）。 性的一些缺陷，比如，X射线晶体学技术要求必须将样品制作 为晶体，生物分子尤其是分子量大的生物分子结晶非常困 难，对溶液内样品使用的核磁共振技术对样品本身有限制， 它只能应用于相对较小的蛋白质。冷冻电镜技术有着其鲜 明的优点：不需要结晶，溶液样品通过快速冷冻方法包埋在 一层玻璃态冰中更接近于其生理状态，可同时获得多个状态 的结构，可研究其动态的结构，所需样品量极少。尽管如此， 长期以来，X射线晶体学技术占据着绝对的统治地位。冷冻 电镜技术一直是这3大技术中最弱的一个，因其结构解析的 分辨率低，甚至有时被嘲笑为blobology（只能看见一堆轮廓的 技术），但一直在不停地进步着，结构解析分辨率逐渐提升， 图1 2017年诺贝尔化学奖得主，从左到右依次为 直到最后一个障碍被成功突破——直接电子探测器开始被 JacquesDubochet、JoachimFrank和RichardHenderson 用于记录电镜图像，从而产生了质的飞跃（图2）。2013年底， （图片来源：） 加州大学旧金山分校程亦凡研究组和DavidJulius研究组合 作首次利用直接电子探测器K2相机和冷冻电镜单颗粒技术 [1-2] 1 异军突起的冷冻电镜技术