巴里坤草原西伯利亚蝗虫肠道内高产纤维素酶菌株筛选-食品科学.PDF

388 2007, Vol. 28, No. 09 食品科学 ※生物工程 曾献春，季 荣*，牟贵平 (新疆师范大学生命科学与化学学院，新疆 乌鲁木齐 830054) ：从采集到的新疆巴里坤草原西伯利亚蝗虫活体标本肠道内分离筛选高产纤维素酶细菌菌株并对其进行初步 鉴定。采用常规方法分离肠道菌；利用羧甲基纤维素钠刚果红 (CMC-Na)改良培养基初筛分解纤维素菌株，选取透 明水解圈较大的菌株测其纤维素酶活力进行复筛；利用VITEK-32生化鉴定仪(法国梅里埃公司)对复筛菌进行鉴定。 实验结果表明以羧甲基纤维素钠刚果红(CMC-Na)培养基作为初筛培养基效果较好，初筛到30株菌，选取水解圈较 大的10 株菌进行复筛，复筛得到4 株产纤维素酶活性较高的菌株。经初步鉴定其中一株菌可能是干燥棒杆菌；另 一株菌可能是耳葡萄球菌，两株菌未鉴定出。 ：西伯利亚蝗虫；肠道菌；纤维素酶 Screen of High-yield Cellulase Strain from Intestinal of Gomphocerus sibiricus ZENG Xian-chun，JI Rong*，MU Gui-ping (School of Life Science and Chemistry, Xinjiang Normal University, Urumqi 830054, China) ※生物工程 食品科学 2007, Vol. 28, No. 09 389 纤维素是植物残体的主要成分约占植物干重的 1.1.4.2 筛选培养基 33.4%～50%，是地球上丰富的可再生资源，每年由光 羧甲基纤维素钠- 刚果红培养基：CMC-Na 20.0g， 合作用生成的上亿吨生物物质中，纤维素就占了近一 蛋白胨 10.1g，酵母粉 5.0g，氯化钠 5.0g，KH2PO4 半。由于纤维素中存在许多高能氢键，仅能利用一小 1.0g，MgSO4 ·7H2O 0.2g，琼脂15g，蒸馏水1000ml， 部分，绝大部分都被弃置[1]，目前对纤维素的降解和利 pH7.0。 用主要依靠纤维素酶的分解。纤维素酶是指能水解纤维 1.1.4.3 菌种产酶培养基[7] 素β-1,4 葡萄糖苷键的酶，使纤维素分解成纤维二糖和 牛肉蛋白胨液体培养基。 葡萄糖的一组酶的总称[2]。其主要是由内切葡聚糖酶(也 以上培养基均在121℃、灭菌20min 后使用[7]。 称CX 酶或CMC 酶)、外切葡聚糖酶(也称C1 酶或滤纸 1.1.5 试剂 酶)、β-葡萄糖苷酶三个成分组成的诱导复合酶系[3]。纤 革兰氏染色试剂[8]和DNS 试剂[9]。 维素酶(cellulose)来源广泛，在自然界有许多可分泌纤维 1.2 方法 [ 4 ] 素酶的微生物，它们包括：真菌、细菌、放线菌 。 1.2.1 菌株分离 目前微生物降解纤维素的方法在医药、日用化工、食 在无菌条件下将活体标本解剖，用浸有无菌水的棉 品发酵、废水处理、工业洗涤、中草药提取、环境 签在其肠道内取样，在牛肉蛋白胨固体培养基平板划线 [5-6] 保护等各个领域都有一定程度上的应用 。