植物细胞培养和原生质体培养.pptVIP

Brassica leaves at the start and end of incubation in enzyme solution Freshly isolated potato protoplasts Two protoplasts ready to fuse together Putative somatic hybrid plants 杂种植株的筛选 方法同花药培育植株倍性 的鉴定。 Somatic hybrids have ALL of the chromosomes from each parent plant 2. 物理融合： 包括显微操作、离心震荡、激光照射及电融合等，其中电融合应用最普遍。 进行电融合时，将一定密度的原生质体悬液置于一个融合小室，小室两端装有电极，在不均匀的交变电场作用下，原生质体细胞彼此靠近，紧密接触，在两个电极间排列成串珠状，此时，若是以强度足够的电脉冲，就可使质膜发生可逆性电击穿，从而导致细胞融合。 二、融合过程： PEG法融合采用 23%-30%的PEG处理高密度混合细胞，细胞密度达到2×105个/ml。 电融合：细胞先在交流电场中聚集，然后通过直流脉冲融合。结合融合特定的缓冲液体系，可完成高效的细胞电融合。 技术参数：融合模块电压 5-300V 脉冲宽度 0-300ps，按5μs递增脉冲形式 方波 多