流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用.pptVIP

流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用 湖南师范大学附属湘东医院儿科 张卫国 背景 流式细胞术检测T、B、NK淋巴细胞亚群已较为广泛的应用于儿科临床 许多疾病涉及儿童相应免疫功能异常 临床工作中更有效的理解和应用流式细胞术以评估儿童的免疫状况，指导疾病的诊断、治疗还缺乏系统的学习材料 尤其是临床一线的儿科医务工作者对流式细胞术的临床应用更有待进一步加强认识和学习。 免疫细胞及发育 SL SC ProB CFU MØ PMN Plet RBC PreB PT T THYRUM Epi. BM CD3+ IFN-γ、IL-2 IL-4 、5 、6、8、9、10、13 Th 检测对象 原则：免疫功能受损者均应常规评估淋巴细胞亚群 免疫功能包括： 免疫防御功能 免疫自稳和耐受功能 免疫监视功能 免疫防御功能受损 易发生感染 反复感染 严重感染 多种病原与特殊病原感染 常规治疗效果不佳的感染 除了宿主免疫防御受损容易造成上述少见感染状况之外，感染本身也可造成继发性免疫防御受损，因此免疫评估应注意原发和继发两方面的问题 免疫自稳和耐受功能受损 过敏性疾病：并非所有这类患者都需要进行淋巴细胞亚群的检测。对于一些严重的过敏患者应考虑淋巴细胞亚群的检测。 ①　婴幼儿时期全身严重湿疹样表现。 ②　嗜酸性粒细胞显著增多 ③　血清IgE水平明显增高（IgE1000IU/L） ④　伴有反复、严重感染的患者 自身免疫和自身炎症性疾病 ①存在难以控制的自身免疫反应情况及出现明显的自身免疫性淋巴增殖情况 ②合并反复感染的患者 ③存在自身炎症反应 ④长期免疫抑制药物、生物制剂使用前后 免疫监视功能受损 主要引起肿瘤 血液系统肿瘤：儿童时期最为多见的是血液系统肿瘤 其他肿瘤及实体瘤：其他系统肿瘤患者也应酌情进行淋巴细胞亚群的检测，既可能存在原发性淋巴细胞亚群的异常，也可能出现继发性改变，尤其是进行各种化疗时，淋巴细胞亚群大多会受到影响  其他特殊情况 血常规中淋巴细胞明显异常 家族成员中有免疫缺陷病史 长期使用免疫抑制剂者 基本数据判断 应进行绝对计数和相对数的判别 相对数的三个基本公式 [公式a] CD3+%+CD19+%+CD16/56+%=100%±5% [公式b] CD4+%+CD8+%=CD3% [公式c] CD4+/CD8+比值1（1.5 ~ 2，新生儿期可达 4）。 绝对计数的判断 绝对数标准不同仪器和年龄段及人群存在差别。 个体间变化也比较大。 各个实验室所采用的标准有所不同。应根据实验室的参考范围进行评估。  如何判断淋巴细胞亚群中哪种或几种细胞发生了变化？ 在淋巴细胞亚群结果判别中既要注意绝对计数的判别，也要判别相对数也就是百分比的变化。 淋巴细胞亚群发生变化可以是一种也可以是几种同时发生变化。这些变化可以是绝对计数的变化，也可以是相对数的变化，可以增多也可以减少。 根据基本公式a和b ，一种淋巴细胞亚群绝对数的变化在检测结果中不会影响到其他亚群绝对数变化，但可能引起自身相对数和其他淋巴细胞亚群相对数的变化。应注意判别。 淋巴细胞亚群变化的特点和临床价值 很多情况使用“可能”、“也可 能”等不确定词汇，说明外周血 T、B、NK 细胞绝对计 数和相对百分比变化程度较大。 这种变化一方面来 自于儿童随年龄变化的特征，另一方面还受到许多环 境、发育和疾病因素的综合影响。 因此评估淋巴细胞 亚群的变化不应是孤立的，应同时结合临床与其他辅 助检查结果，对临床价值作出判断。 淋巴细胞亚群的 变化也很少与临床疾病有一一对应的情况，这些变化 与临床疾病往往是一对多或多对一的。 淋巴细胞亚群变化的特点和临床价值 单一淋巴细胞亚群变化 仅CD3+T 细胞增多 CD3+T% 增高；根据基本公式a，CD19+%和CD16/56+%相对降低。 例： CD3+T 5 000 ；其他淋巴细胞无变化；CD3+T 90% ；CD19+ 8%；CD16/56+ 1%。CD3+T细胞增多又可分为： ①CD4+细胞增多为主，CD4+%增高；根据基本公式b，CD8+%相对降低；CD4+/CD8+比值增高。如生理现象，生命早期CD4+T细胞相对较多，比例较高；一些细菌感染可使CD4+T增多，比例增高；CD4+/CD8+ 比值也增高。锌制剂可能使CD4+ 增多。 ② CD8+ 细胞增多为主，CD8+%增高；根据基本公式b，CD4+%相对降低；CD4+/CD8+ 比值降低。如EBV感染引起的传染性单核细胞增多症；其他许多病毒感染、真菌感染及肿瘤等也可出现此类变化。③CD4+ 和CD8+T细胞均增多，CD4+%，CD8+%无改变；CD4+/CD8+ 比值正常。 两种淋巴细胞亚群变化 CD3+ T 和CD19+ B 细胞增多 CD3+ T 和CD19+ B%增高