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江苏省句容市第三中学 徐 霞 * * 血细胞计数板的结构 1 5 血细胞计数板的使用 2 血细胞计数板的计算 3 中间平台分为两半,各刻有一个方格网。 方格网内有九个大方格,中间的一个大方格就是计数室。 计数室的边长一般为1mm,计数室的高度为0.1mm,因此计数室的容积为0.1mm3。 一、血细胞计数板的结构 方格网 计数室 25x16 16x25 计数室的规格 中格 中格 小格 小格 (400小格) (400小格) 1.镜检计数室 在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。若有污物,则需 ,吹干后才能进行计数。 二、血细胞计数板的使用步骤 2.加样品 先将 放在计数室上,用吸管吸取培养液,滴于盖玻片 ,让培养液 。多余培养液用 吸去。 3.计数 稍待片刻,待酵母菌 ,将计数板放在载物台的中央,先在低倍镜下找到 ,再换高倍镜观察、计数并记录。 盖玻片 边缘 自行渗入 滤纸 全部沉降到计数室底部后 计数室 清洗 1、计数时要求每小格内约有 个菌体为宜。因此培养后期需要对菌液进行 。 2、若选用25×16规格的计数板则选 个中方格(共 小格)计数,若选用16×25规格的计数板则选 个中方格(共 小格)计数。 4—5 稀释 5 4 1 2 3 4 5 1 4 3 2 100 80 注意事项 3、位于小方格边界线上的菌体一般只数 线上的。如遇酵母出芽,芽体大小达到母细胞的一半时,即作 个菌体计数。 5、血细胞计数板洗涤方法: ,不能用试管刷。 4、在显微镜下观察到的菌体有活菌也有死菌。 因此要想统计活菌数,必须对菌体 (如台盼蓝)。 注意事项 上方和左边 两 未被染色的为活菌! 染色 先浸泡后冲洗 通过1个小方格中酵母菌的数目去推算 三、利用血细胞计数板进行计算 X 稀释倍数 1个小方格中酵母菌 的平均数 1个小方格的体积 N 1ml = 如何计算1ml培养液中酵母菌的数目(N )? 4个中方格(100小格)中酵母菌数目 100 16x25规格: 4个中方格(80小格)中酵母菌数目 80 25x16规格: 0.1x1/400m m3 1ml=1cm3=103mm3 0.1x1/400x10-3 ml 4 3 5 2 1 4 3 2 1
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