一教学要求实验八酶联免疫吸附试验ELISA.pptVIP

一 教学要求 掌握酶联免疫吸附试验的基本方法及其原理 学习双抗夹心法检测抗原物质的基本操作 三 材料与器材（略） 五 注意事项 （1）正确洗涤酶标板，加洗涤液时要小心，勿使洗涤液溢出，流入周围孔中，造成交叉污染。洗涤后应尽量甩干孔内残液。洗涤液加入孔后，须保持 3 min再弃去。 （2）加样品时应从最高稀释度逐一加至最低稀释度，这样可以不换吸头。 （3）底物应在临用前配制，同时注意避光。 六 思考题 （1）分析酶标抗体不纯对抗原检测结果的影响（双抗夹心法） （2）比较免疫荧光法和ELISA的最适检测对象。 * 实验八 酶联免疫吸附试验（ELISA） 二 实验原理 酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay 简称ELISA)是在免疫酶技术(immunoenzymatic techniques) 上发展起来的一种新型免疫测定技术，ELISA过程包括：抗原吸附在固相载体上，这个过程称为包被，加待测抗体, 再加相应酶标记抗体，生成抗原--待测抗体--酶标记抗体的复合物，再与该酶的底物反应生成有色产物。借助分光光度计的光吸收计算抗体的量。待测抗体的量与有色产物成正比。同理也可包被抗体，测定抗原含量。 ELISA最常用的四种方法：直接法测定抗原；间接法测定抗体；双抗体夹心法测定抗原；竞争