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考点2 微生物的分离与计数 要点探究 1.筛选菌株的原则是:人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长。 2.探究菌株筛选原理的不同点。 ①选择培养基的成分:纤维素作为唯一的碳源 ②鉴定方法:刚果红染色法,即刚果红与纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后,培养基出现以纤维素分解菌为中心的透明圈 ①选择培养基的成分:尿素作为唯一的氮源 ②鉴定方法:在培养基中加入酚红指示剂,若指示剂变红,pH升高,说明细菌能分解尿素 分解纤维素的微生物 土壤中分解尿素的细菌 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 3.在微生物的筛选与计数实验中,设置对照实验的目的是:排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。 4.证明培养基未被污染的对照——用空白培养基作对照。 5.证明选择培养基选择作用的对照——用牛肉膏蛋白胨培养基接种等量同种菌液作对照。 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 6.微生物的计数。 要点探究 根据观察到的菌落数,结合公式推出样品中的活菌数。每克样品中的活菌数=(C÷V)×M 设置重复组取平均值计数;计数菌落数在30~300的平板 当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌 间接计数法 (活菌计数法) 观察到单个细菌,但不能区分死菌与活菌 用计数板计数 利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量 显微镜直接计数法 结果 方法 原理 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 特别提醒 (1)设置重复组,增强实验的说服力与准确性。同时为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。 (2)为了使结果接近真实值,应设置三个或三个以上的平板,计算出菌落平均数。 (3)计算时明显偏离实际值(本组实验其他平板计数值)的要舍弃掉后求平均值。 (4)对照实验的设计首先要明确设计的目的,分析出实验的自变量之后才能准确设计。 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 【例?】无菌操作是微生物接种技术的关键;传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中,均要无菌操作。回答下列相关问题: (1)消毒和灭菌是两个不同的概念,灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理__________________________。 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 ①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿 ⑥接种环 ⑦培养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀 A.①②③⑧⑨ B.④⑤⑥⑦⑩ C.①②③④⑤⑥⑧ D.以上全部 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 要点探究 (2)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行___________________,接种前要进行______________,在整个微生物的分离和培养中,一定要注意在无菌条件下进行。 (3)在微生物的实验室培养中,获得纯净培养物的关键是_____________________________。下图是利用________________________法进行大肠杆菌接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的,操作上应注意: 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 要点探究 ①每次划线前要___________________________; ②冷却后从上一区划线末端开始划; ③首尾区__________________。 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 要点探究 (4)培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。 对固体培养基应采用的检测方法是 ______________________ ,观察培养基上是否有菌落产生。 (5)利用培养基不仅可以分离培养大肠杆菌,也可以进行植物组织培养。与大肠杆菌培养明显不同的是,用于组织培养的培养基中还需要加入 。 (6)有位同学在家制作泡菜时,为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素,结果发酵失败,原因可能是_____________ 。 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 答案:(1)A (2)调整pH 高压蒸汽灭菌 (3)防止外来杂菌的入侵 平板划线 灼烧接种环 不连接(不重叠) (4)将未接种(接种等量无菌水)的培养基在适宜的温度下放置适当时间 (5)植物激素(或生长素和细胞分裂素) (6)青霉素杀死了乳酸菌
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