辐照灭菌确认方案.docVIP

#####有限公司 研发部 # # # 辐 照 灭 菌 确 认 方 案 验证方案审批表 一、 验证方案拟订表 方案起草人 方案起草日期 二、验证方案审核 审核人（签名） 日 期 三、 验证方案批准 批准人（签名）： 批准日期： 年 月 日 方案执行日期： 年 月 日 四、 验证执行小组成员 成 员 签 名 组 长 副组长 小组成员 目 录 1. 主要内容和适用范围 2. 辐照剂量测定 2.1 原理 2.2 选择SAL和获得产品样品 2.3 测定初始污染菌 2.3.1 初始污染菌的计算 2.3.2 初始污染菌的测定 2.3.3 校正系数的测定 2.3.4 产品释出物的检验 2.4 建立验证剂量 2.5 完成验证剂量实验 2.6 建立灭菌剂量 3. 辐照灭菌加工确认 4. 验证总结报告书  ####辐照灭菌确认方案 1．主要内容和适用范围 本文对于###的灭菌确认过程做了详细描述，确认的内容包括辐照剂量的设定及辐照加工确认。本方案制定的目的在于证实产品辐照符合ISO11137-2006的要求，灭菌后的产品能达到10-6的无菌保证水平。 2．辐照灭菌剂量设定 2.1原理 验证的原理是基于ISO11137方法，即先对辐照前产品的初始污染菌进行测定，然后选择验证剂量。再用验证剂量对产品进行辐照，并测定存活微生物的样品件数，以此来确定最低灭菌剂量（SAL=10-6）。 2.2选择SAL和获得产品样品 该产品的SAL选定为10-6，收集常规生产的标准包装产品，于灭菌前对三个批号进行随机抽样，每批至少抽取10个样品，其中取样比例（SIP）为1。 2.3测定初始污染菌 2.3.1初始污染菌的计算 测定至少30个样品单元的每件样品的初始污染菌并计算， a)三批中的每一批的平均的单元产品初始污染菌（批平均），和 b)所有的单元产品平均初始污染菌（总平均初始污染菌）。 ISO11137-2006或GB/T18280-2007中，7.2.1.3.2测定至少30个样品单元的每件样品的初始微污染菌并计算：批平均值和总平均值。当初始污染菌较低（如小于10）；允许集中检测单独一批中10个单元产品来确定批平均初始污染菌。 将三批产品的每批平均初始污染菌与总平均初始污染菌比较，确定是否有一批平均值是总平均值的两倍或两倍以上。 确定初始污染菌测定中是否提供了校正因子，建立测定校正因子的方法。 2.3.2初始污染菌测定 测定依据：ISO11737-1：1995 试验方法：（平板计数法） 1) 洗脱液： PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液：取磷酸二氢钾3.56g，磷酸氢二钠7.23g，氯化钠4.30g，蛋白胨1.0g，加水1000ml，微温溶解，分装，过滤，灭菌。 2) 样品处理： 取样品10cm2，剪碎，加PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液10ml，浸泡，振摇，作为1:10的供试液。 3) 需气菌培养： 取供试液1ml，置直径90mm的无菌平皿中，注入15～20ml温度不超过45℃的溶化的营养琼脂培养基，混匀，凝固，倒置培养。 4) 霉菌培养： 取供试液1ml，置直径90mm的无菌平皿中，注入15～20ml温度不超过45℃的溶化的玫瑰红钠培养基，混匀，凝固，倒置培养。 5) 计数： 除另有规定外，细菌培养48小时，逐日点计菌落数，一般以48小时的菌落数报告；霉菌、酵母菌培养72小时，逐日点计菌落数，一般以72小时的菌落数报告；必要时，可适当延长培养时间至5～7天进行菌落计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。计算各稀释级供试液的平均菌落数，按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平板的菌落平均数不小于15，则两个平板的菌落数不能相差1倍或以上。 结果： 批 号 样品号 需气菌 (cfu/件) 霉菌 (cfu/件) 需气菌 (cfu/件) 霉菌 (cfu/件) 需气菌 (cfu/件) 霉菌 (cfu/件) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 平均数 批平均初始污染菌为 （cfu/件） 总平均初始污染菌为 （cfu/件） 2.3.3校正系数的测定 根据ISO11737-1中描述的初始污染菌的确定方法进行试验，测定校正因子，该因子取自对活菌计数的初始污染菌检测技术的验证。 测定依据：ISO11737-1:1995 试验方法： 1） 标准菌株准备：取枯草杆菌黑色变种（ATCC9372），传代培养，制成100cfu/ml备用。 2） 洗脱液准备：pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液：取磷酸二氢钾3.56g，磷酸氢二钠7.23g，氯化钠4.30g，蛋白胨1.0g，加水1000ml，微温溶解，分装，过滤，灭菌。 3） 制备悬液稀释液，使0.1