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主讲:鲍成满;知识目标
掌握染菌对发酵过程的影响;
掌握发酵异常现象及原因分析
掌握杂菌污染的途径
能力目标:
能够发现种子培养和发酵的异常现象;
能进行染菌的检查和判断、发酵染菌原因分析;
能杂菌污染的挽救与处理措施。;第一节 染菌对发酵的影响
第二节 发酵染菌的分析
第三节 杂菌污染的途径和防止染菌;第一节 染菌对发酵的影响;染菌率的统计 ;一 染菌对不同发酵过程的影响 ;柠檬酸发酵:产酸后,发酵液pH很低,不易染菌,主要防止前期染菌。但对于能在较低pH发酵液中生长的杂菌来讲,其对柠檬素发酵危害也很大,如青霉菌。;谷氨酸发酵:周期短,产酸快,培养基不太丰富,不易染菌,主要防噬菌体。一旦受到噬菌体污染,其蔓延迅速,难以防治,而且容易造成连续污染。
; 疫苗发酵:现在疫苗多采用深层培养,这是一类不加提纯而直接使用的产品,在其深层培养过程中,一旦污染杂菌,不论死菌、活菌或内外毒素,都应全部废弃。; 肌苷、肌苷酸发酵:生产菌为多种营养缺陷型,生产能力差,培养基营养丰富,易受到各种生长较快的杂菌污染,如芽孢杆菌,而且染菌后培养基中营养成分迅速消耗,严重抑制生长菌生长和产物的生成。;二 不同时间发生染菌对发酵的影响 ;发酵前期染菌:较容易染菌,污染后杂菌迅速繁殖,与生产菌争夺营养成分和氧,严重抑制生产菌的生长繁殖,最终导致产物的积累大大减少,甚至造成发酵失败。;发酵中期染菌:
危害极大,不但影响生产菌的继续生长,还会严重干扰生产菌的产物合成代谢,减少产物的生成。而且由于营养成分大量消耗,发酵产物正在大量积累,一般挽救处理困难,危害性很大。故在实际生产中应做到早发现快处理。;发酵后期染菌:
发酵后期产物积累较多,营养接近耗尽,此时染菌影响相对小些,一般可继续发酵;若污染严重,可采取提前放罐来减少损失。;三 染菌程度对发酵的影响;四 染菌对产物提取和产品质量的影响
菌体自溶,发酵液发粘、发臭,过滤困难
;第二节 发酵染菌的分析;1 种子培养染菌后的异常现象 ;2 发酵染菌后的异常现象 ;溶解氧和??氧化碳水平异常:可以断定是发生染菌现象
;泡沫过多:污染噬菌体非常容易产生过多泡沫;
代谢异常:营养物质的利用和产物的生成出现异常现象。
;二 染菌的检查与判断
1.染菌的检查;肉汤培养基检查法(酚红变色pH6.8-8.4)
双层平板培养法检查;;2.检查法的不足;三 染菌原因的分析; 项目 百分率%
总空气系统有菌 19.96
种子带菌或怀疑种子带菌 9.64
夹套穿孔 12.36
盘管穿孔 5.89
接种管穿孔 0.39
阀门渗漏 1.45
搅拌轴密封渗漏 2.09
罐盖漏 1.54
其它设备渗漏 10.13
操作原因 10.15
接种时罐压跌零 0.19
培养基灭菌不透 0.79
泡沫冒顶 0.48
原因不明 24.94;
项目 百分率%
管理不善 25. 08
阀门渗漏 23.30
盘管穿孔 14.20
种子带菌 14.15
空气系统有菌 10.0
其它 7.49
原因不明 5.78
; 管理不善而染菌的有31个罐批,占25.0
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