二维电泳和质谱技术鉴定BmNPV包埋型病毒粒子的蛋白组成.docVIP

PAGE 2216 中 国 农 业 科 学 41卷 7期 蔡克亚等：二维电泳和质谱技术鉴定BmNPV包埋型病毒粒子的蛋白组成 PAGE 2217 中国农业科学 2008,41(7):2215-2218 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2008.07.047 收稿日期：2007-03-29；接受日期：2007-11-08 基金项目：“973”计划（2005CB121000）；江苏大学青年科学基金资助项目（1241330001） 作者简介：蔡克亚（1980-），男，江苏泗洪人，硕士研究生，研究方向为分子生物学。E-mail：caikeya2@。通讯作者陈克平（1960-），男，安徽无为人，研究员，博士，研究方向为分子生物学。Tel：0511-8791923；E-mail：kpchen@ 二维电泳和质谱技术鉴定BmNPV包埋型病毒粒子的蛋白组成 蔡克亚，陈克平，刘晓勇，姚 勤，李 军 （江苏大学生命科学研究院，江苏镇江 212013） 摘要：【目的】BmNPV包埋型病毒ODV（occlusion-derived virus）粒子在BmNPV感染家蚕初期起了非常重要的作用，主要包含了病毒感染初期所必须的蛋白质,解析其蛋白组成有利于进一步理解病毒和宿主关系，同时也为了进一步了解BmNPV的生活史提供依据。【方法】利用二维电泳对ODV病毒蛋白进行分离，采用考马斯亮兰G-250染色，经质谱鉴定。【结果】共获得70个蛋白点，大部分集中在等电点5～9之间，约占蛋白点总数的61%。其中59个蛋白点适合质谱分析, 数据库检索出20种蛋白，其中13种与AcMNPV中鉴定一致，而另7种蛋白是BmNPV中新鉴定出来的。此外，在二维电泳图谱上显示GP41蛋白点有21个，VP39蛋白点有9个。【结论】超速离心结合PCR技术提取ODV蛋白方法可行；二维电泳和质谱联用技术是一种研究病毒蛋白质组快速有效的方法。 关键词：2-D；质谱；BmNPV；蛋白质组；ODV（occlusion-derived virus） Studies on Protein of the Occlusion-Derived Virus of Bombyx mori L. Nucleopolyhedrovirus Using Two-Dimensional Gel Electrophoresis and Mass Spectrometry CAI Ke-ya, CHEN Ke-ping, LIU Xiao-yong, YAO Qin, LI Jun (Institute of Life Sciences, Jiangsu University, Zhenjiang 212013, Jiangsu) Abstract: 【Objective】The occlusion-derived virus (ODV) is produced when nucleocapsids retained in the nucleus are enveloped using virus-induced intranuclear membranes which appear to be derived from the nuclear membrane.It is specially adapted for primary infection of the host midgut epithelium. As such, the virion must contain the proteins essential for host range determination and initiation of infection. So knowledge of virion composition is a prerequisite for functional investigation.【Method】In the present study, two-dimensional gel electrophoresis and mass spectrometry techniques were used to identify the proteins present within or associated with the occlusion-derived virus (ODV) virion, the separated prot