实验6淀粉酶的固定化.pptVIP

第二章 酶的应用 实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测 * 什么是酶制剂？ 蛋白酶和脂肪酶 酶制剂：含有酶的制品。 胃蛋白酶 * 酶制剂的缺点 通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活。 溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本。 反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量（难分离）。 * 什么是固定化酶？ 固定化酶：将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。 * 酶的固定化方法 ① ② ③ ④ 吸附法 共价偶联法 交联法 包埋法 * 共价偶联法 交联法 包埋法 * 实验原理 用吸附法将α-淀粉酶固定在石英砂上，一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示剂溶液（KI-I2溶液）测试，流出物呈红色表明水解产物糊精生成。 糊精 淀粉 α-淀粉酶 β淀粉酶 麦芽糖 葡萄糖 糖化淀粉酶 遇碘显红色 遇碘不显色 遇碘显蓝色 * 实验设备及用品 5mL塑料注射器、 50mL烧杯、滴管、自行车用气门心及夹子、注射器架、试管及微量离心管3支。 固定化柱 控制流速 注射器架 阀门 * Step1：α-淀粉酶的固定化 ①吸附：5mgα-淀粉酶+4mL蒸馏水+5g石英砂，搅拌30min。 ②装柱：装入下端接有气门心并用夹子封住的注射器中。 ③洗柱：用10倍柱体积的蒸馏水洗涤除去未吸附的游离淀粉酶。