果蝇杂交实验设计方案.docVIP

*** *** 果蝇杂交实验方案 组员：鲁登位 周云 马晓龙 张桃 詹剑琴 史鸿宣 王丽权 嘎玛央金 动科 1002 班 第二组 ㈠ 实验目的： 本次实验中我们使用果蝇作为材料来验证基因分离规律、自由组合规律、伴性遗传。加 深理解遗传定律。 同时在实验过程中要掌握果蝇杂交技术和学会运用生物统计方法进行 数据分析。 ㈡ 实验原理： 选取果蝇做为遗传学研究的原因： 1、果蝇体型小，体长不到半厘米；饲养管理 容易，既可喂以腐烂的水果， 又可配培养基饲料； 一个牛奶瓶里可以养上成百只。 2、果蝇繁殖系数高，孵化快，只要 1 天时间其卵即可孵化成幼虫， 2-3 天后变 成蛹，再过 5 天就羽化为成成虫。从卵到成虫只要 10 天左右，一年就可以繁殖 30 代。 3、果蝇的染色体数目少，仅3 对常染色体和 1 对性染色体，便于分析。作遗传 分析时，实验者只需用放大镜或显微镜一个个地观察、计数就行了。 分离定律 ：一对等位基因在杂合子中保持相对独立性，形成配子时彼此分离并随机分配到 不同的配子里。 F1 配子的分离比是 1： 1; 基因型的分离比是 1：2：1， F2 表型的分离比是 3： 1。 自由组合定律： 位于非同源染色体上的两对等位基因决定的性状在杂种第二代形成配子时是 自由组合的。 由分离定律可知一对等位基因决定性状在杂种第二代表型比是 3：1，两对互 不连锁的基因决定的性状在杂种第二代表型比是 9：3：3：1。 伴性遗传： 位于性染色体上的基因所控制的性状在遗传上与性别相联系的遗传现象， 称为伴 性遗传。 ㈢ 实验材料： 果蝇材料： 6 个品种的果蝇： 4 号 、 6 号、 18 号、 22 号、 25 号、 e 号 其性状特征如下： 性状 眼色 体色 翅型 刚毛 品种 25 号瓶 白 w 灰 y 长+ 直 Sn 6 号瓶（ 三隐性）白 w 灰 y 长(小翅 )m 卷 sn W 4 号瓶红X 灰 y 残 Vg 直 Sn 18 号瓶红st 灰 y 长+ 直 Sn e 号瓶 (三显性 )红st 黑 B 长+ 直 Sn 22 号瓶 白 w 灰 y 长+ 直 Sn 实验器具和药品： 用具：果蝇饲养瓶、麻醉瓶、双目解剖镜、毛笔、镊子、标签 药品：乙醚、玉米粉、琼脂、蔗糖、酵母粉、丙酸 ②培养基的制作 : 根据实验进程的需要提前配置好培养基 水 76ml 玉米粉 8.25g 糖 6.2g 琼脂 0.62g 丙酸 0.5ml 酵母 0.7g （四）实验分组 经过小组讨论将小组分为三小组，做三组实验来探究出一个最好的可以在一组实验中验证 三个定律的杂交组合。具体实验方案如下： 第一组： 选用黑檀体三显性（ e 号瓶）和灰体三隐性（ 6 号瓶） 第二组： 选用黑檀体三显性（ e 号瓶）和红眼残翅（ 4 号瓶） 第三组 ： 灰体三隐性（ 6 号瓶）和 18 号瓶 （五）实验步骤 ： 1、选出亲本蝇 5-6 对（保证亲本雌蝇为处女蝇） : 挑选处女蝇的方法：将亲本培养瓶中 的成蝇全部除去 （可在晚上 22：00 至 23：00 期间将成蝇移入另一个培养瓶中， 次日早晨 8： 00 至 9：00 对新羽化的果蝇进行挑选） 。以后每隔 6-8h 观察一次，并将新羽化的雌雄成蝇 取出并分别放入培养瓶内备用。 2、F1 杂交培养与观察统计 : 把选出的雌雄果蝇，根据杂交实验组合的要求装入一个培养 瓶内，每瓶放 2～3 对。贴上标签标明正反交 , 组名, 日期. 在 20-25 ℃恒温培养箱中培养 ,7 ～ 8 天后, 倒去亲本蝇 . 倒去亲本蝇后的 4～5 天 F1 代成蝇出现后 , 观察记录其表型和数量 3、F2 代果蝇的培养 : 从 F1 代中选出 10～15 对果蝇，放入新的培养瓶中继续杂交。每瓶 2～3 对（这里的雌蝇无须是处女蝇） 。在各瓶上贴好标签。于 20-25 ℃恒温培养箱中培养 . 培养 7～8 天后 , 移去亲本蝇 4、F2 代果蝇观察与统计 4～5 天后,F 2 代成蝇出现 , 开始观察。检查眼色、翅形、刚毛，各类果蝇分别计数，检查过 的果蝇处理过 2 天后再检查第二批， 连续检查 6～8 天，即 3～4 次，以保证获得足够数目的 被观察后代 ，记录于对应的统计表中。 （六）结果记录与分析 分离定律：( 任选一种 )4 号和 e 号 体色 6 号和 18 号 翅型 6 号和 e 号 翅型 预期结果：（翅型同理） ♀( 灰体) E/E × ♂ ( 黑檀体 )e/e F1: E/e( 灰体 ) ⊕ F2: 基因型 E/E 2E/e ee 表型 ( 灰体) ( 灰体 ) ( 黑檀体 ) 3 : 1 F1、F2代统计分析表： 观察结果 黑檀 ♂ × 灰体 ♀（或长、残） 黑檀体数（长） 灰体数（残） 统计日期 合 计 2．自由组合定律 :