流加发酵与高密度培养.pptVIP

HCDC问题的解决 HCDC遇到的主要问题有： 产物或代谢副产物的积累对生长的抑制 氧的限制 HCDC中培养基粘度不断增加，引起混合不充分 CO2和热量的高释放率 下面以大肠杆菌为例，来探讨如何解决HCDC中的问题。 大肠杆菌HCDC中乙酸的形成 乙酸是大肠杆菌流入中心代谢途径的碳超过生物合成的需要和产生能量超过细胞的容量时产生的。 高浓度的乙酸（如pH7，超过5gL-1）会降低HCDC的生长速率、生物量和可获得的最大细胞密度。 乙酸毒害作用的机理还未被阐明。很有可能是因为抑制DNA、RNA、蛋白质和脂肪的合成。 HCDC遇到的问题 控制比生长速率在产生乙酸的临界值以下 一般可通过控制限制性底物浓度控制比生长速率。 比生长速率临界值： 在复合和半合成培养基中，约为为0.2h-1和0.35h-1； 在合成培养基中，为0.14h-1。 HCDC遇到的问题 减少乙酸合成的方法 选择合适的培养基 例如，甘油比葡萄糖吸收进入细胞的速度要慢，可能会减少流入糖酵解途径的碳，这会极大的减少乙酸的合成。 HCDC遇到的问题 此外，加入某些氨基酸（如谷氨酸、甲硫氨酸），可减轻乙酸的毒害作用。 使用酸和碱调节pH而积累下来的盐会使乙酸的毒害作用加强。 大肠杆菌 葡萄糖 Pta Ack 乙酸 去往其它产物（乙醇、乙醛等） TCA循环中过剩的碳 乙酸代谢过程示