多糖的研究概况1.pptVIP

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(1)细胞内多糖的提取分离步骤 脱脂 植物体粉碎 热水提取 过滤 滤液浓缩 醇沉 脱蛋白 ? 分部收集 脱洗 上柱分离 透析 沉淀复溶 ? 浓缩干燥 (2)细胞壁多糖的提取分离步骤 细胞壁 碱化提取 脱脂 多聚半乳糖醛酸酶处理 ? 浓缩干燥 分部收集 洗脱 上柱分离 透析 (3)细胞外多糖的提取分离步骤 脱脂 植物体粉碎 水提取 醇沉 沉淀复溶 CTAB或 CPC沉淀 浓缩干燥 分部收集 洗脱 上柱分离 透析 沉淀复溶 (4) 膜分离纯化多糖的步骤 透析 多糖水提液 预过滤 超滤1 超滤2 反渗透浓缩 (低压大孔)(高压小孔) 干燥 5.常用提取方法 (1)热水提取:温度控制在80~100℃,搅拌4~6h,反复提取2~3次。 (2)稀酸提取:如1%醋酸、1%苯酚,时间宜短,温度最好不高于5℃。 (3)稀碱提取:0.1~1M氢氧化钠、氢氧化钾,为防止多糖降解,常通以氮气或加入硼氢化钠或硼氢化钾。稀酸稀碱提取液应迅速中和或迅速透析,浓缩与醇析而获得多糖沉淀。 (4)稀盐提取:用0.1~1M氯化钠水溶液可提取含有糖醛酸或硫酸基团的多糖。 (5)酶解:破坏细胞壁,增加多糖的溶出 。 医疗经费投入模式也将相应 发生重要改变 多糖应用举例: 胡芦巴胶(Fenugeek Gum) 胡芦巴胶为胡芦巴种子内胚乳部分制成,主要成分为半乳甘露聚糖。半乳甘露聚糖是一种水溶性多糖,在低浓度下能形成高粘度的稳定溶液。可作为增稠剂、稳定剂、乳化剂、粘合剂等广泛应用于石油开采、食品、医药、印染浆纱、日用化工、采矿选矿、印染浆纱、兵工炸药等行业。 在大麦中提取的葡聚糖的AFM像(浓度为10ug/ml,载体云母片,空气中成像) a:是刚制备的新鲜样品直接观察; b:将样品滴在云母片上,真空干燥后观察;c:将干燥后的样品用蒸馏水重新滴湿,三天后观察;d:将干燥后的样品用水滴湿后,立即观察(箭头所指为糖链形成的环及分支)。 ③免疫学方法 抗原和抗体会相互结合,一定结构的多糖(寡糖)会抑制抗体-抗原的相互结合,不同的糖(半抗原)有不同的抑制常数。 利用α-糖苷酶和β-糖苷酶对多糖底物的催化反应来确认多糖链中糖苷键类型,利用酶学方法分析糖肽连接方式。 ④酶学方法 : ⑤X射线衍射应用于糖三维结构的测定。但糖结构柔性较大、通常以微晶及粉末存在、结晶构象与溶液构象差异较大等,目前还有局限性。 六:多糖生物活性与构效关系 关于多糖结构与功能关系的研究已经成为生命科学的最前沿领域之一,多糖的功能与其结构密切相关,研究多糖的构效关系有着十分重要的意义。 1 立体构效 X-衍射分析表明,香菇多糖及长褶多糖均具β-三股绳状螺旋型立体结构,在香菇多糖加入尿素或二甲亚砜,改变了多糖立体构型,其活性就丧失, 充分证实立体构型对多糖活性的显著性影响[39]。 2 多糖的组成和糖苷键类型 抗肿瘤多糖结构研究表明:从菌体中提得的活性多糖一般由葡萄糖组成,而且葡聚糖主链上的β-1,3或β-1,4糖苷键键和支链上的β-1,6甙键为必须。 从香菇中提得的抗肿瘤多糖,也由β-1,3结合的直链葡聚糖构成,以5个分子上有2个分子的比率,在6位有β结合的侧链葡萄糖分子[40]。 香菇多糖的化学结构 由植物中提取的抗肿瘤活性多糖一般由半乳糖或半乳糖醛酸等组成, 从禾本科植物箬竹中提取的由木糖、阿拉伯糖及半乳糖等组成箬竹多糖,从紫松果菊分离的由阿拉伯糖和半乳糖所组成的多糖,可促进巨噬细胞产生肿瘤细胞坏死因子。从双子叶植物苦楝的树皮分离到的抗肿瘤多糖,由半乳糖∶阿拉伯呋喃糖∶葡

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