中国实验动物学会.pdfVIP

中国实验动物学会 团体标准 《实验动物 胶原纤维Masson染色方法》 编制说明 联 系 人：吴旧生 联系电话 编制单位：浙江大学动物科学学院 时 间：2016年12月31 日 1 中国实验动物学会团体标准 《实验动物 胶原纤维Masson染色方法》编制说明 （一） 工作简况：包括任来源、起草单位，协作单位、主要起草人及其所做工作 等； 2015年6月，国家标准化管理委员会批准中国实验动物学会作为团体标准试点 单位。2016年11月，经过全国实验动物标准化技术委员会审查同意，由中国实验 动物学会下达 《实验动物 胶原纤维Masson染色方法》团体标准编制任务。 （二） 主要工作过程、标准主要起草人及其所做的工作 起草单位为浙江大学动物科学学院、协作单位浙江省医学科学院。 主要起草人：吴旧生、刘月环、罗廉佳、乐启蒙。 (三）标准编写背景 胶原纤维是人体中的结缔组织的主要成分，分布在全身的各个部位，组成胶原 纤维的主要成分是胶原蛋白。新鲜时呈白色，故一般称为白色纤维。在HE染色中被 染为淡红色。它的性质是具有一定韧性及紧固性，因此它能够抵抗一定的牵拉力而 不至于撕裂或拉断它们常聚集成粗细不等的束，呈波浪状。胶原纤维在HE染色法被 染成粉红色，也可以用一些阴离子的染料来进行染色，用淡绿可把它们染为绿色， 用甲苯胺蓝可将其染为蓝色。常用的特殊染色法有VanGieson，.Masson和Mallary 等方法。 该染色方法有利于胶原纤维发生病变如坏死或透明变性的区别诊断，并被广泛 应用于肿瘤的诊断：如纤维瘤 （肉瘤），平滑肌、横纹肌瘤 （肉瘤），神经纤维瘤 （肉 瘤）、恶性纤维组织细胞瘤等，由于都含有大量的纤维，HE染色均为红色。应用Masson 氏染色法，可将胶原纤维染色蓝色或绿色，肌源性组织被染为红色。也可广泛用于 与慢性炎症的区别，如慢性阑尾炎，疤痕愈合时，纤维愈复病灶可被染为鲜红色或 蓝绿色，SARS病患者愈合后有的肺部可出现疤痕，粘连，此时可显示蓝色或绿色。 可用于鉴定肝硬化及创伤组织的修复程度。肝硬化时的肝组织有许多不同大小的假 2 小叶，用上述方法显示时，可显示出不同的组织结构。 利用该技术可以对结缔组织进行染色、是区别慢性炎症、肿瘤和正常纤维结构 的有效手段，但动物、器官、染料、实验步骤等多种因素均可引起染色结果差异， 使得染色的结果评价困难，直接影响了其临床诊断价值，染色结果的好坏直接关系 到诊断的准确性, 必须按一定的标准程序进行操作，提高可比性。 （四）标准编制原则； 1. 适用性原则：材料种类、病料本身、实验方法和过程、染色步骤等种种原因 引起染色结果有较大差异,在制定指南时留有一定可变范围，以适应上述复杂的条 件。 2.可操作性原则： 根据长期工作的经验和发表的文献,舍弃一些不具有操作性 的方法和步骤。 （五）确定标准的主要内容 （如指标、参数、公式、性能要求、试验方法、检验规 则等）的论据 （包括试验、统计数据），修订标准时，应增列新旧标准水平的对比； 1 范围 本标准规定了实验动物组织石蜡切片中结缔组织的染色方法。 本标准适用于各种实验动物和动物实验组织材料石蜡包埋样本的结缔组织检 查。 2 定义 胶原纤维：胶原纤维是结缔组织的主要成分，分布在全身的各个部位，组成胶 原纤维的主要成分是胶原蛋白。新鲜时呈白色，故一般称为白色纤维。在HE染色中 被染为淡红色。 3 主要试剂 3.1天青石蓝液的配制： 天青石蓝 （Celestin blue B） 1.25g 硫酸铁铵 （ferric ammonium sulfate）1.25g 蒸馏水 200ml 甘油 （glycerin） 30ml 3 将前两者溶于蒸馏水中，然后煮沸，冷