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超导核磁共振波谱仪 尹秀丽 2015.11.17 内 容 仪器基本信息 基本原理 样品配置方法及要求 应用情况 谱图处理软件 核磁共振波谱仪基本信息 仪器型号：AVIII 500 仪器配置：超屏蔽磁体、BBO宽带探头、BBI反式探头、60位自动进样器、BCU05低温附件 参数：1H的共振频率：500.13MHz 13C的共振频率：125.7MHz …… 核磁共振的产生V 弛豫 将原子核置于外磁场中时，磁能级发生分裂，对于I=1/2的核，就会出现两个能级，那么高能级和低能级的粒子数分布情况可用波尔兹曼分布来描述。 如果高低能级粒子数相等，电磁波的吸收和发射相互抵消，观察不到净吸收信号。 要持续检测到净吸收信号，必须使低能级的粒子数大于高能级的粒子数，这就要求必须有某种过程存在，它能使处于高能级的原子核回到低能级，以保持低能级上的粒子数多于高能级，这种从激发状态回复到平衡的过程就是弛豫。 化学位移的表示方法 在实际中，把化学位移写成不依赖于磁场或频率的相对数值的形式。定义化学位移是相对于某个标准物质进行测量的： 化学位移相对表示方法的意义 即使使用不同的仪器或在不同的场强下，相同的官能团具有相同的ppm值。不同的官能团由于存在于不同的电子环境因而具有不同的化学位移，从而使结构鉴定成为可能。 自旋-自旋耦合（Scalar Coupling） 化学位移只考虑了核外电子云对核产生的屏蔽作用，忽略了同一分子中磁核间的相互作用，这种相互作用很小，对化学位移没有影响，而对谱峰的形状有着重要影响。磁核间通过中间媒介（电子云）而发生的这种作用，【此中间媒介就是所谓的化学键】就叫做自旋-自旋耦合（J-耦合） 自旋耦合作用的结果 自旋-自旋偶合引起共振线的分裂而形成多重峰。多重峰实际代表了相互作用的原子核彼此间能够出现的空间取向组合。 同核J-偶合(Homonuclear J-Coupling) 多重峰出现的规则: 1. 某一原子核与N个相邻的核相互偶合将给出(n+1)重峰. 2. 等价组合具有相同的共振频率.其强度与等价组合数有关. 3. 磁等价的核之间耦合作用不出现在谱图中. 4. 偶合具有相加性. 异核J-偶合(Heteronuclear J-Coupling) 去耦（Decoupling） 原子核间的耦合导致谱图的复杂化。 如果峰数不多，耦合的方式仍可分析出。但当很多锋出现时，耦合方式的分析就不是那么容易。 去耦（Decoupling） 去耦除了可以简化碳谱还因为有核的Overhauser效应而增加信噪比。 NMR谱图包含的信息 Information: Larmor 频率 原子核 化学位移: 结构测定(功能团) J-耦合: 结构测定(原子的相关性) 偶极耦合: 结构测定 (空间位置关系) 弛豫: 动力学 样品配置方法及需求 核磁管 直径5mm，玻璃、透明、无异物、清洗干净 氘代试剂 不管是固体样品还是液体样品，均需要选择合适的氘代试剂进行溶解。不能使用普通试剂，因为锁场必须使用氘代试剂。常用的氘代试剂有：氘代氯仿、重水、氘代DMSO、氘代甲醇、氘代丙酮、氘代四氢呋喃等。 配置好的溶液 应为透明均一的溶液，溶液内不能有悬浮物或者沉淀，不能有分层现象，不能有浓度梯度存在，样品高度在4.5~5.5cm，不能低于4.5cm。 样品配置方法 固体样品测试H谱：取1.5mL离心管，置于天平上，归零，取样品5-10mg（分子量在300-500的样品）放置离心管中，加入0.5mL氘代试剂，进行充分溶解，溶解完全后，将溶液移至核磁管中，盖上核磁管帽。在核磁管外壁贴上标签，标明样品名称，溶剂等信息内容，最后用透明胶将标签固定。 固体样品测试C谱：取1.5mL离心管，置于天平上，归零，取样品20-30mg（分子量在300-500的样品）放置离心管中，加入0.5mL氘代试剂，进行充分溶解，溶解完全后，将溶液移至核磁管中，盖上核磁管帽。在核磁管外壁贴上标签，标明样品名称，溶剂等信息内容，最后用透明胶将标签固定。如果固体不能完全溶解，请将离心管进行离心，然后取上清液，以保证样品配置要求。 液体样品（分子量在300-500）测试H谱和C谱：测试H谱，取半滴到一滴样品滴入0.5mL氘代试剂中，转移至核磁管。测试C谱，取一滴到两滴样品滴入0.5mL氘代试剂中，转移至核磁管。 Sample Rule #1: for Bruker NMR spectrometers, the NMR tube insert cannot exceed max depth (19mm or 20mm) from the center of the