生物技术制药展示PPT-6.1 第一组 HPV疫苗-谭晓晴范文心王明慧招婉雯郑林林.pptVIP

人类乳头瘤病毒（HPV）疫苗 背景 宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤，仅次于乳腺癌，是导致女性死亡的第二大恶性肿瘤。 低危型：外生殖器湿疣 高危型：宫颈癌 HPV的结构 无包膜的小分子DNA病毒 颗粒呈球形 呈二十面对称 直径约为55nm 双链闭合环状DNA分子 HPV基因 早期转录区（ER) ：编码蛋白 E1-E7 晚期转录区（LR）：编码蛋白L1、L2 上游调控区（URR）：负责调控 疫苗免疫机制——预防性疫苗 主要为体液免疫 L1——主要衣壳蛋白 较强免疫原性 抗原滴度高 L2——次要衣壳蛋白 交叉中和活性高 可预防多种疾病 疫苗免疫机制——预防性疫苗 包括细胞免疫和体液免疫 与早期区E6和E7有关 疫苗免疫机制——治疗性疫苗 疫苗制备——预防性疫苗 HPV18 L1 VLPs的制备 1）HPV18 L1基因的优化、合成 包括：昆虫细胞偏爱密码子的改造，C端截短32个氨基酸，降低mRNA的二级结构等 2）优化的HPV18 L1基因插入重组质粒 通过Ecoli I和Xba I两个酶切位点插入pFastBac I的载体中，从而获得pFastBac I-HPV18 L1的重组质粒 重组质粒 感受态细胞 疫苗制备——预防性疫苗 导入 培养筛选阳性克隆 提取重组病毒DNA 转染sf-9昆虫细胞 上清液：重组杆状病毒 3）获得重组杆状病毒载体 4）HPV18