大肠杆菌培养实验的报告.docxVIP

大肠杆菌培养实验报告 篇一：大肠杆菌检测实验报告　　国标法测定大肠杆菌样本的细菌总数　　实验目的　　实验原理：国标法操作的原理　　实验器材：　　培养箱，10只移液管，1只250ml锥形瓶，5只大试管，试管架，4个平皿，500ml大烧杯1个，电子天平，纱布，脱脂棉，灭菌锅，PH计或PH试纸，100ml量筒，橡皮手套，超净台　　实验药品：　　磷酸盐缓冲液，蒸馏水，LB培养基，琼脂，5%NaOH，5%HCl　　实验步骤：　　一：　　10只移液管，1只250ml锥形瓶，5只大试管，4个平皿，500ml大烧杯1个，100ml量筒进行洗涤，然后一起放入高压蒸汽灭菌锅中在121摄氏度条件下灭菌20min。灭完菌后烘干，完成后放入超净台中。　　用酒精擦拭超净台，紫外消毒30min　　二：　　1：用电子天平称取成品LB 3.1241g和琼脂1.8756g放入250ml的洁净锥形瓶中。 2：用量筒量取125ml的蒸馏水加入该锥形瓶中，制成培养基。　　3：用棉花堵住该锥形瓶的瓶口，用牛皮纸包住瓶口，用橡皮筋扎牢，再将培养基放入灭菌锅中在121摄氏度之下灭菌20min。　　4：灭完菌后放入超净台中备用。　　三：　　1：取1只无菌250ml锥形瓶，用量筒向其中加入49ml PBS　　2：将1ml样品加入到该锥形瓶中，摇匀制成1:50的细菌溶液。　　3：取4只试管，编号1—4　　4：用无菌移液管分别向4只试管中加入9ml的PBS　　5：用1ml无菌移液管从样品中移取1ml菌液加入到1中.震荡试管使菌液均匀。 6：用1ml无菌移液管从1号试管中移取1ml的细菌溶液加入2号试管中，摇匀　　7：用另一只1ml无菌移液管从2号试管中移取１ｍｌ细菌溶液，加入3中，摇匀．．．．．．以此类推直至4只试管中均加入了细菌溶液。　　9：取4只平皿，编号1—4　　10：分别用4只无菌移液管从这4只试管中移取１ｍｌ的菌液置于4只平皿中，加入４５—５０摄氏度温度下的培养基，约１５ｍｍ厚度。缓慢旋转平皿使菌液与培养基混合均匀；待培养基冷凝后倒置。　　11：将培养基在３6摄氏度条件下培养12小时。　　12：取出培养皿，选择细菌个数在30至300个之间的平皿数细菌的个数。　　四：实验结果（记得在操作过程和得到结果时拍照）　　1号，2号菌落个数多不可计，舍弃　　4号平皿中菌落数目小于10 cfu ，舍弃　　3号平皿中菌落分布较均匀，数3号中的菌落数，一共有210个 cfu 。　　计算样品中细菌浓度为：1.05 × 105 Cfu/ml　　点评　　超净台中的实验步骤讲述详细，明确，不错。前面的步骤叙述有点乱，建议按照如下标题重新调整顺序。 　　实验步骤： 　　1、 仪器清洗　　将烧杯，培养皿、试管等仪器用洗衣粉清洗，超声5min.然后用清水清洗，超声5min,最后用三蒸水清洗，放入烘箱中烘干。　　2、 培养基配制　　精确称量。。。。。放入锥形瓶中，加入。。mL蒸馏水，摇匀　　3，灭菌　　包扎、灭菌，烘干备用　　3、 超净台中的操作（如上） 　　除了实验步骤和结果，还要有讨论和注意事项  　　例如：实验讨论： 　　1、 评价该方法（操作简易程度，灵敏度如何，适用性）　　2、 为何选择细菌个数在30至300个之间的平皿数细菌的个数？　　注意事项　　比如各种仪器的使用注意事项，以及保持洁净，防止染菌等。篇二：微生物生理生化实验报告　　实验十 一IMViC与硫化氢试验 指导教师：李海花　　周六 第三组　　学号：XX041 姓名：宋天佳 专业：20XX级水产养殖　　学号：XX025姓名：皇 昊 专业：20XX级化学1班　　学号：XX055 姓名：续鹏辉 专业：20XX级水产养殖　　一、实验目的　　了解IMViC与硫化氢反应的原理及其在肠道菌鉴定中的意义和方法。　　二、实验原理　　IMViC是I－吲哚（indol test）、M－甲基红（methyl red test）、V－伏-普（Voges-Prolauer　　test）和C－柠檬酸盐（citrate test）4个实验的缩写。这4个实验主要用来快速鉴别产气　　杆菌与大肠杆菌，多用于水的细菌检查。大肠杆菌虽非致病菌，但在饮用水时若超过一　　定指标，则表示水质受粪便污染。产气杆菌也广泛存在于自然界中，因此检查水是要将　　两者分开。硫化氢（H2S）实验也是检查肠道细菌的生化实验。　　（一）吲哚试验（indol test）　　吲哚试验是用来检测吲哚试验的产生，有些细菌分解培养基中的色氨酸生成吲哚（靛基质），经与试剂中的对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰吲哚而呈红色。　　色氨酸＋H2O色氨酸酶 吲哚＋NH3＋丙酮酸