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* * * * * * 3.限制性酶谱分析法 将初步筛选的阳性克隆小量培养后，提取重组质粒或重组噬菌体DNA，用1-2种RE酶切，然后进行凝胶电泳，检测插入DNA片段大小。 * * Xho I Not I Xho I MEKK1 1200bp Promoter 400bp pUC-mT 2700bp Colony 1 2 3 1 3100bp 1200bp 400bp 2700bp Xho I cutting Xho I + Not I cutting 1200bp pUC-mT/pLMP1-MEKK1 4300bp 实例 * * 4.DNA序列测定 为了确证目的基因序列的正确性，必须对重组体的DNA进行序列测定。 * * 5.目的基因表达产物测定法 例：免疫斑点测定法 如果表达产物是一种蛋白质或蛋白质的一部分，它具有抗原性可与其特异抗体发生免疫反应。 此法实验操作极似菌落(或噬菌斑)原位杂交。将平板上的克隆转移到滤膜上，处理滤膜使菌体裂解，释放出蛋白质，固定于滤膜上，加入标记抗体。 如果抗体用放射性同位素标记，则免疫反应后进行自显影；若加入的抗体用酶偶联(酶标)，那么此酶就可将无色底物水解成有色产物。 * * 基因载体 目的基因 质粒 噬菌体 病毒 PCR cDNA 人工合成 基因文库 限制性内切酶 有切口的载体 有切口的目的基