女贞子龟甲对肾阴虚小鼠的影响—报告.doc

项目来源：浙江省重大科技攻关项目（No：2006C13014）：“铁皮石斛药材及相关产品质量标准研究”负责人：吕圭源 [通讯作者] *陈素红, 研究员、硕导，Tel: (0571) E-mail:chensuhong06@。 尊敬的编辑您好：非常感谢您对本文提出宝贵的意见。现将修改和需说明的情况简述如下： 1.在小鼠慢性酒精性肝损伤模型中，最能代表肝细胞损伤的血清ALT，正常组与模型组分别为：30.29±4.64、38.88±9.78。尽管统计学存在差异，但38.88是否还在小鼠ALT正常值范围？作者应在文中列举出具权威性正常参考值范围以显示其模型的成功，这关系到本文的科学性问题。 答：慢性酒精性肝损伤时，由于造模时间长，肝细胞广泛而严重的坏死，肝细胞浆内ALT释放殆尽， 加之ALT半衰期短导致血清中酶活性逐渐降低，模型组的ALT比正常组可能只会略有升高。 2.实验对干鲜两种石斛进行保肝作用研究，对此，作者应为这种实验设计的目的与意义进行简要说明，并对干鲜在保肝作用的优劣进行必要的评价与分析；见文中标红部分。 3.表1、2本为一批动物进行的血液生化实验，合并为一个表更自然；已合并。 4.慢性肝损造模时间较长（65天），费时费力，但论文仅报道了3个指标，且其中仅ALT、AST与肝损直接相关。指标稍嫌单薄，这是本文一大硬伤。 答;本文的实验目的只是观察不同剂量铁皮石斛及铁皮枫斗对小鼠慢性酒精性肝损伤模型血清ALT、AST、TC的影响，是一个尝试性探索实验。作为药开发来说，ALT、AST这两个与肝损伤直接相关的指标确实缺少足够的说服力，我们会在后期的实验中增加相关指标的检测。 铁皮石斛对小鼠慢性酒精性肝损伤模型血清谷丙转氨酶、谷草转氨酶、胆固醇的影响 吕圭源1 陈素红2* 张丽丹1 方慧1 苏洁1 黄敏聪2 汤小华2 1.浙江中医药大学 杭州，310053 2.温州医学院 温州，325035 【摘要】目的：观察不同剂量铁皮石斛及铁皮枫斗对小鼠慢性酒精性肝损伤模型血清谷丙转氨酶（ALT），谷草转氨酶（AST），胆固醇（TC）的影响。方法：雄性ICR小鼠，分为9组：3个鲜铁皮石斛组（3，6，9g/kg），3个铁皮枫斗组（0.45，0.90，1.35g/kg），设立正常对照组、模型对照组、阳性对照（联苯双酯滴丸）组。采用连续灌胃给予56°白酒65天造成慢性酒精性肝损伤模型，每天给完药后2h灌予酒精造模。末次给予酒精12h后取血，测定血清ALT，AST，TC。结果：与正常对照组相比，模型对照组小鼠血清ALT，AST，TC明显升高。与模型对照组相比，鲜铁皮石斛(3g/kg)和铁皮枫斗（0.45g/kg）能降低血清ALT。鲜铁皮石斛（3g，6g/kg）与铁皮枫斗（0.45g/kg）能降低血清AST、TC。铁皮枫斗（0.90，1.35g/kg）能降低血清AST。结论：铁皮石斛和铁皮枫斗均对慢性酒精性肝损伤小鼠的肝功能相关指标（ALT，AST，TC）有一定的改善作用。 关键词 铁皮石斛；铁皮枫斗；酒精性肝损伤；谷丙转氨酶；谷草转氨酶；胆固醇；小鼠 铁皮石斛在中药学中属补阴药，具有卓著的滋阴潜阳的功效。我们前期实验研究表明，铁皮石斛鲜品及干品（铁皮枫斗）对急性酒精性肝损伤小鼠有保肝作用。为了进一步考察其效果，本实验采用与临床更为接近的小鼠慢性酒精性肝损伤模型，观察铁皮石斛鲜品及干品（铁皮枫斗）对其肝功能相关生化指标的影响。 1 实验材料 1.1 药物和试剂 造模剂：红星二锅头酒（清香型白酒，酒精度56％vol），批500ml/瓶，北京红星股份有限公司，启封后4℃冷藏保存。 受试药：铁皮石斛（鲜品）、铁皮枫斗（即干品，重量约为鲜品1/6～1/7），经鉴定为兰科植物铁皮石斛Dendrobium candidum Wall.ex Lindl的新鲜或干燥茎。取鲜铁皮石斛提取原液，分别稀释成浓度为含生药量0.30，0.60，0.90g/mL的药液；取铁皮枫斗提取原液，分别稀释成浓度为含生药量0.045，0.090，0.135g/mL 的药液（分别相当于铁皮石斛0.30，0.60，0.90g/mL），4℃冷藏保存。 阳性药：联苯双酯滴丸，批规格1.5mg×250丸，浙江医药股份有限公司新昌制药，用蒸馏水配制成浓度为0.40mg/mL的药液，4℃冷藏保存。 试剂：丙氨酸氨基转移酶（ALT）试剂盒，批号P090511；天门冬氨酸氨基转移酶（AST）试剂盒，批号P090411；胆固醇（TC）试剂盒，批号：P080212，上海复星长征医学科学有限公司。 1.2实验动物 ICR小鼠，雄性，18-22g。浙江省 1.3实验仪器 SELECTRA-E全自