GB/T 33411-2016酶联免疫分析试剂盒通则.pdf

ICS 71.040.30 G 66 OB 中华人 民共和 国 国彖标准 GB/T 33411—2016 酶联免疫分析试剂盒通则 Guidelines for enzyme immunoassays kit 2016-12-30 发布 2017-04-01 实施 GB/T 33411—2016 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC 387)提出并归口。 本标准起草单位:江苏省微生物研究所有限责任公司。 本标准主要起草人:宓晓黎、李利东、黄丽俊、袁建兴、杜姝莲。 I GB/T 33411—2016 酶联免疫分析试剂盒通则 1范围 本标准规定了酶联免疫分析试剂盒的技术要求、检验方法、使用说明书和标签。 本标准适用于小分子化合物检测用的酶联免疫分析试剂盒。 2技术要求 2.1试剂盒主要组成及要求 试剂盒由一整套试剂和材料组成，应严格按照其说明书的规定使用，并满足下列要求： a） 包被微孔板：在微孔板上包被相应的抗体或抗原； b） 抗体：可使用多克隆抗体或单克隆抗体； c） 系列标准溶液:定量检测用时，应配制至少5种浓度的标准溶液； d） 标记物:标记物可以是标记抗原或标记抗体;标记酶为辣根过氧化物酶或其他适宜标记的酶； e） 底物显色剂：过氧化氢溶液/四甲基联苯胺溶液或其他底物显色剂； f） 洗涤剂：磷酸盐缓冲溶液或其他缓冲溶液； g） 终止剂：硫酸溶液或其他溶液。 2.2外观 试剂盒外观完整，内装试剂齐全;包被抗原或抗体的微孔板透明干燥且用真空包装；液体组分应澄 清透明；冻干组分呈疏松体，经复溶后,其溶液应澄清，无异物。 2.3标准曲线线性 以标准溶液考察线性和范围 。标准曲线为Y-ln（ ）等数学模型计算时，在试剂盒规定的标准浓度 范围内，其线性相关系数的绝对值应$0.99。 2.4灵敏度 2.4.1 检出限 一般用空白标准溶液 （ ”$10）测定均值加或减2倍标准差的值（几±2$）所对应的浓度表示检 出限。 2.4.2定量限 用空白标准溶液（ ”$10）测定均值加或减3倍标准差的值（70±3.s）所对应的浓度表示定量限 。且 定量限值应大于或等于标准曲线中最低浓度点值，满足一定的精密度和准确度的要求。 2.5精密度 2.5.1批内变异系数 在同一实验室，由同一操作员使用同一批次试剂盒，按相同测试方法，对同一被测试对象进行 1 GB/T 33411—2016 10次以上独立测试，验证测试结果之间的一致程度，其变异系数应不大于20%。 2.5.2 批间变异系数 在不同实验室，由不同操作员使用不同批次试剂盒，按相同测试方法，对同一被测试对象进行 10次以上独立测定，验证测试结果之间的一致程度，其变异系数应不大于25%。 2.6正确度 用标准品进行验证 。在标准曲线范围内，选取3个不同浓度进行回收试验 ，所添加浓度应涵盖方法 测定低限浓度、方法测定最高浓度和关注浓度 。对于已制定最高残留限量 （MRL）的物质，关注浓度为 MRL；对于未制定MRL的物质，关注浓度为常见限量指标;对于禁用物质，关注浓度为两倍方法测定低 限 。其回收率应在60%〜120%范围内。 3检验方法 3.