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正己烷对大鼠抗氧化酶活力与损伤的实验研究齐宝宁作者简介齐宝宁男讲师硕士主要从事职业卫生与职业中毒教学研究通讯作者唐国慧作者简介齐宝宁男讲师硕士主要从事职业卫生与职业中毒教学研究通讯作者唐国慧陕西中医学院公共卫生系劳动卫生与环境卫生学教研室西安西安交通大学医学院劳动卫生与环境卫生学教研室西安摘要目的研究正己烷对大鼠肝组织抗氧化酶活力和损伤的影响方法只雄性大鼠随机分成组即阴性对照组染毒组和阳性对照组环磷酰胺每组只经腹腔注射染毒周检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活力用单细胞凝胶电泳技
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正己烷对大鼠抗氧化酶活力与DNA损伤的实验研究
齐宝宁作者简介: 齐宝宁(1980-),男,讲师,硕士,主要从事职业卫生与职业中毒教学研究。通讯作者: 唐国慧,E-mail: tgh029@
作者简介: 齐宝宁(1980-),男,讲师,硕士,主要从事职业卫生与职业中毒教学研究。
通讯作者: 唐国慧,E-mail: tgh029@
(1. 陕西中医学院公共卫生系劳动卫生与环境卫生学教研室,西安,712046;
2. 西安交通大学医学院劳动卫生与环境卫生学教研室,西安,710061)
E-mail: qbn0506@126.com
摘要: 目的 研究正己烷(n-Hexane)对大鼠肝组织抗氧化酶活力和DNA损伤的影响。 方法 40只雄性SD大鼠随机分成5组,即阴性对照组、75、150、300mg/kg染毒组和阳性对照组(环磷酰胺),每组8只。经腹腔注射染毒4周,检测肝组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力,用单细胞凝胶电泳技术(SCGE)检测大鼠肝细胞DNA的损伤。 结果 随染毒剂量增加,肝组织匀浆中GSH-Px 、SOD活力随染毒剂量增加而减小,经方差分析,组间差异有统计学意义(P0.05);各实验组与阴性对照组作Dunnett-t检验,高剂量组与阴性对照组之间差异有统计学意义(P0.01),该结果与阳性对照组结果一致;实验组之间再作SNK-q检验,低剂量组和高剂量组差异有统计学意义(P0.05)。肝细胞经SCGE检测,阳性对照组与阴性对照组比较,尾长、尾DNA%、尾矩、Olive尾矩差异均有有统计学意义(P0.01);中、高剂量组与阴性对照组比较,尾长、尾DNA%、尾矩、Olive尾矩均有有统计学意义(P0.01);低剂量组与阴性对照组,差异无统计学意义;实验组之间再作SNK-q检验,低剂量组和高剂量组差异均有有统计学意义(P0.05)。尾矩值与染毒剂量作相关分析,相关系数r为0.981,呈正相关(P0.05)。结论 正己烷使大鼠机体抗氧化能力受到明显的影响和肝细胞DNA发生损伤。
关键词:正己烷;DNA损伤;单细胞凝胶电泳技术;大鼠
正己烷(n-Hexane,CAS:110-54-3)属于直链饱和脂肪烃类,化学式为C6H14,分子式为
CH3(CH2)4CH3,相对分子质量为86.18;无色、高挥发性、易燃、常温下为微有异臭的液体;几乎不溶于水,易溶于氯仿、乙醚、乙醇[1,2]。正己烷主要作为溶剂,广泛应用于制鞋、印刷、电子、粘胶配制、除污、干洗、植物油提取等行业[3]。有文献表明:正己烷对神经细胞脂质有极化作用,导致膜扩张,通透性增强。动物吸入正己烷后,血中乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、酸性脱氢酶、β-尿苷酸化酶活性增高。这些内酶的外逸,间接说明正己烷具有膜损伤作用[4,5]。沈齐英等对大鼠进行静式急性吸入染毒,从抗氧化酶系统的角度研究测定了超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)的活力,结果表明,机体抗氧化损伤的能力受到明显的影响,削弱了机体消除自由基的能力,发生了脂质过氧化损伤[6]。正己烷引起机体氧化还原系统的改变,削弱机体消除自由基的能力,是否会进一步引起DNA损伤,目前尚未见有报道。本实验用不同剂量的正己烷染毒大鼠,观察其对大鼠抗氧化酶活力的影响和DNA损伤作用,为探讨正己烷的遗传毒性和中毒机制提供理论依据。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1 动物 健康雄性SD大鼠40只,体重180~220g,由西安交通大学医学院实验动物中心提供,观察1周后进行染毒实验。
1.1.2 试剂 正己烷(国产分析纯),环磷酰胺(上海华联制药有限公司),Triton X-100 ( Gibco公司,美国),戊巴比妥钠、低熔点琼脂糖(LMA)、正常熔点琼脂糖(NMA)、二甲基亚砜(DMSO)、乙二胺四乙酸二钠盐(Na2EDTA)、十二烷基肌氨酸钠、溴化乙锭(EB)均为美国Sigma公司产品。
1.1.3 仪器 DYY = 3 \* ROMAN III水平电泳槽 ,DYY = 3 \* ROMAN III-33A电泳仪 ,NIKON荧光显微镜型及NIKON AFX- = 2 \* ROMAN IIA型拍摄装置 ,恒温水浴箱,DY89-Ⅱ型电动玻璃组织匀浆器,CASP图像分析软件。
1.2 实验方法
将40只雄性SD大鼠随机分为5组,即阴性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组和阳性对照组(环磷酰胺),每组8只,采用腹腔注射染毒[5]。阴性对照组正常喂养,低、中、高暴露组染毒剂量分别为75、150、300mg/
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