实验七染色体核型分析.docVIP

【实验项目】染色体核型分析 实验室名称 显微分析实验室 实验室地点 学时 2 实验类型 验证 每组人数 2-4 选做或必做 必做 实验目的 通过几种生物染色体标本的观察，掌握染色体核型分析的方法 内容提要 生物染色体标本的观察；染色体核型的分析 重点难点 染色体核型的分析方法 主要仪器及耗材 显微镜、尺子、剪刀 实验七：染色体核型分析 〖实验目的和要求〗 观察分析细胞有丝分裂中期染色体的长短、臂比和随体等形态特征；学习染色体组型分析的基本方法和技能。 〖实验原理〗 染色体组型分析是细胞遗传学研究的基本方法，是研究物种演化、分类以及染色体结构、型态与功能之间的关系所不可缺少的重要手段。染色体组是指二倍体生物配子中所含的染色体总称，常以“Ｘ”表示。同一物种的同一染色体组内各染色体的形态、结构和连锁群是彼此不同的，但它们却相互协调，共同决定生物性状的发育。 ????研究染色体组型的方法，一是靠有丝分裂时染色体的形态特征，另一是靠减数分裂时染色体的形态和特征。本实验着重介绍有丝分裂的染色体组型分析。 ????细胞有丝分裂中期是识别染色体个性特征的最佳时期，而染色体组型分析就是进行染色体特征的鉴别和描述，其形态的鉴别主要依据染色体的长度、着丝粒位置、付缢痕的有无和位置、随体的有无、形状和大小等资料进行分析。现分别介绍如下： ?1.染色体长度，同一染色体组内各染色体的长度是不一致的，其绝对长度可在显微镜上测量，或用放大照片测量后换算。由于染色体制片过程中使用的药剂及方法不同，另外供观察的细胞分裂不可能保证同一时期，故染色体的收缩有差异而导致绝对长度在同一物种或个体不同细胞间发生差异，针对这种情况，在分析中常用染色体的相对长度来表示。 ????在染色体长度测量中，对染色体的两条臂要分别测量，一般随体不计入染色体长度内。 ??2.着丝粒的位置：每条染色体都有一着丝粒，其位置可因不同染色体而异。由于着丝粒把染色体分为两个染色体臂：长臂和短臂，它们的比率（即臂比）便可确定着丝粒的位置。 ??3.付缢痕的有无和位置：有些染色体上除着丝粒，还另有一不着色或缢缩变细的区域称符缢痕。 ??4.随体的有无、形状和大小：有些染色体在短臂的末端有一棒状小体称为随体，随体和染色体臂之间常以付缢痕相隔，具随体的染色体称SAT染色体。 〖材料和方法〗 细胞有丝分裂永久制片或其中期染色体图象的放大照片。 〖用具和药品〗 剪刀、直尺、胶水。 〖实验步骤〗 （一）染色体标本的制备 1.制片 2.观察制片，选择理想的中期分裂相细胞进行显微摄影，冲洗放大照片 （二）染色体组型分析 1.染色体计数 2.染色体测量和计算 根据放大图片并安下表测量和计算： 编号 长臂 短臂 1 ? ? ? ? 2 ? ? ? ? 3 ? ? ? ? 4 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 3.染色体排队 ①根据染色体的相对长度、臂长和形态特征，将同源染色体归类成对。 ②按由长至短的顺序将各对染色体依次排队。长度相同的染色体则将短臂长的染色体排在前面，随体染色体排在最后。 4.根据臂率将染色体分类。臂率为1.0－1.7，称中部着丝粒染色体(m)，臂率为1.71－3.0，称近中部着丝粒染色体(sm)，臂率为3.01－7.0，称近端部着丝粒染色体（st），臂率超过7.0称端部着丝粒染色体(t)。 5.染色体核型标准图像的制备。 〖作 业〗 完成染色体形态测量数据表及染色体核型图。 相比而言，下面一个实验更容易操作，我们08级生科也是用的下面这个： 实验七 人类染色体的识别与核型分析 实验目的 学习染色体核型的分析方法； 了解人类染色体的特征。 二、实验原理 1．染色体组型(核型)是指生物体细胞所有可测定的染色体表型特征的总称。包括：染色体的总数，染色体组的数目，组内染色体基数，每条染色体的形态、长度、着丝粒的位置，随体或次缢痕等。染色体组型是物种特有的染色体信息之一，具有很高的稳定性和再现性。组型分析能进行染色体分组外，还能对染色体的各种特征做出定量和定性的描述，是研究染色体的基本手段之一。利用这一方法可以鉴别染色体结构变异、染色体数目变异，同时也是研究物种的起源、遗传与进化，细胞遗传学，现代分类学的重要手段。 2．人类的单倍体染色体组(n=23)上约有30000-40000个结构基因。平均每条染色体上有上千个基因。各染色体上的基因都有严格的排列顺序，各基因间的毗邻关系也是较为恒定的。人类的 24种染色体形成了24个基因连锁群，所以，染色体上发生任何数目异常、甚至是微小的结构变异，都必将导致许多获某些基因的增加或减少，从而产生临床效应。染色体异常常表现为具有多种畸形的综合征，称为染色体综合征，其症状表现为多发畸形、智力低下和生长