第十讲核磁共振基本原理及应用.ppt

用于多维异核核磁共振的单键异核偶合常数概要图 同位素的标定 因为自然存在的同位素核种: 15N 及13C 的比例太低, 不足以让我们进行NMR实验, 因此人工的同位素标定是必须的。 对一般使用大肠杆菌(E. coli) 表现蛋白质的系统而言, 15N及13C 的标定只需要将培养基中的氮和碳的来源, 置换成15N的NH4Cl (1g/1L) 及13C 的Glucose (2g/1L) 便可达到, 不过15N的NH4Cl 及13C 的Glucose 造价昂贵。 二项常用的三核共振实验的脉冲图谱 结论 核磁共振硬体的进展: 由于材料科学等方面的进步, 目前世售的核磁共振仪已可达到900 MHz 的等级, 使得光谱的解析度更加提升;而新的超低温探头(Cryo-probe) 的应用, 也大大降低了收集光谱的时间。 核磁共振软体的进展: 近年来由Dr. K Wuthrich 所发展的TROSY实验, 及由Dr. A Bax 所发展的Residual Dipolar Coupling 实验,使得利用核磁共振确定蛋白质结构的速度加快, 蛋白质的大小也更加提升。 综合以上两方面的进展, 利用核磁共振确定蛋白质结构所需的时间将由以往的1~2年降低到半年到一年, 甚至更短; 而蛋白质的大小也由以往的20 kDa 提升到30~50 kDa. 核磁共振基本原理及应用（1） 生物科技可以说是近代最重要的一门科学,从遗传工程的发展, 到复制动物的出現, 每一次重大的进展都给人們带来无穷的想像; 而随着最近轰动一时的人类基因组计划(Human Genome Project) 的完成, 全球的生命科学家又展开了所谓的蛋白质组学(Proteomics) 的研究, 其目的即是希望能了解人类细胞大约十万个蛋白质的结构及其在生命体中所扮演的角色及功能, 以便设计小分子药物来调控这些分子的作用。 前几年, Dr. K. Wuthrich因其在核磁共振学的努力而获得了诺贝尔奖的殊荣, 也更加确认了核磁共振学在二十一世纪的生命科学领域将扮演一举足轻重的角色。 Nuclear Overhauser enchancement 简称NOE, NOE 效应是由原子间的偶极-偶极作用(dipolar-dipolar interaction) 所造成, 其强度和两原子的距离的六次方成反比, 一般来说, 当两个氢原子的距离小于 5? (10-10 M), 他们的NOE 效应便可在NOESY光谱上能观察到, 而 距离越小, 所观察到的NOE 效应便越強, 因此, 以已知距离的一对氢 原子的NOE为标准( 例如苯环上的相临氢原子), 我們便可推得所有 NOE所代表的距离.