人教版高中生物必修二第六章第2节《基因工程及其应用》-课件.pptVIP

一、基因工程 1、当受体细胞为微生物细胞时，经常用CaCl处理细胞，增大细胞壁的通透性，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，即感受态细胞。 2、当受体细胞为双子叶植物细胞时，最常用的就是农杆菌转化法。 3、当受体细胞为单子叶植物细胞时，常用基因枪法。 4、当受体细胞为动物细胞时，最常用的方法是显微注射法。 * 能发光的水母 不能发光的热带斑马鱼 能否能否让热带鱼也能发光? 设想 能发荧光的热带斑马鱼 普通热带斑马鱼是不发荧光的 抗虫害的玉米 抗虫棉 能产生人胰岛素的大肠杆菌 思考： 1、为什么能把一种生物的基因“嫁接”到另一种生物上？ 2、推测这种“嫁接”怎样能实现？ 3、这种“嫁接”对品种的改良有什么意义？ ①不同生物的DNA在空间结构上一致 ②几乎所有的生物都共用一套遗传密码 可定向改造生物 基因工程又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。 通俗地说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状（目的）。 原 理： 操作水平： 结 果： 基因重组 DNA分子水平 实现物种间基因重组、定向改造生物的遗传性状 家蚕能够吐出蚕丝为人类利用 能否让细菌“吐出”蚕丝？ 设想 思考：要把家蚕的合成蚕丝蛋白的基因“嫁接”到细菌上，关键步骤是什么？ 关键步骤一：怎样提取合成蚕丝蛋白的基因？ 关键步骤二：怎样将基因运输到细菌体内？ 关键步骤三：怎样将基因与运载工具连接起来？ 基因的剪刀——限制性内切酶 基因的针线——DNA连接酶 基因的运载工具——基因的运载体 （二）基因操作的工具 基因的剪刀——限制性核酸内切酶 基因的针线——DNA连接酶 基因的运载工具——运载体 1、基因的剪刀——限制性核酸内切酶（简称限制酶） （1）存在： 限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶，能将外来的DNA切断，这种切割作用是在DNA分子内部进行的。 观察各限制酶识别并作用的核苷酸序列，看看它有何特点？ （2）特点： ①只能识别一种 特定的核苷酸序列 ②只能在特定的 位点上切割DNA分子 　 黏性末端　　　　 黏性末端 EcoRI限制酶的切割 (3)限制酶切割的是什么化学键？ 磷酸二酯键 （注意与解旋酶的区别） 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸， 它们之间正好互补配对 这样的切口叫黏性末端。 如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？ 会产生相同的黏性末端，然后让两者的黏性末端黏合起来，似乎就可以合成重组的DNA分子了。 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同种限制酶切割 2、基因的针线——DNA连接酶 黏性末端的黏合： 连接位置： 磷酸与脱氧核糖间的化学键—磷酸二酯键 互补的碱基形成氢键连接 黏性末端的连接： DNA连接酶连接缺口 两DNA片段要具有互补的黏性末端才能拼起来 DNA连接酶的缝合作用 DNA连接酶与DNA聚合酶有什么不一样？ A A T T G C A A T T A A T T DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA聚合酶的作用 DNA连接酶与DNA聚合酶比较 ①作用对象： DNA连接酶是在两个DNA片段之间; DNA聚合酶是在单个脱氧核苷酸与DNA片段之间。 ②作用条件： DNA连接酶不需要模板； DNA聚合酶需要模板（以DNA的一条链为模板） 相同点：都形成磷酸二酯键； 化学本质均为蛋白质。 3、运载体： 常用的运载体主要有两类： 1）质粒 2）噬菌体或某些动植物病毒 运载体的作用有哪些？ 作用一：作为运载工具，将外源基因(抗虫基因)转移到受体细胞(棉花细胞)中去。 作用二：利用运载体在受体细胞(棉花细胞)内，对外源基因(抗虫基因)进行大量复制。 质粒： 质粒是基因工程最常用的运载体。 质粒存在于细菌、酵母菌等生物中，是细胞拟核或细胞核外能够进行自主复制的很小的环状DNA分子。 (2)能在宿主细胞中复制并稳定保存； (1)具有多个限制酶的切点，便于与外源基因连接；（用切割目的基因的同一种限制酶切割运载体，以获得相同的黏性