减数分裂的制片与观察.pptxVIP

植物花粉母细胞减数分裂制片技术和染色体观察; 一、实验目的 1、观察染色体在减数分裂中的行为和变化，识别减数分裂各个时期特点，加深对减数分裂遗传学意义的理解； 2、掌握动、植物减数分裂的制片技术。;二、实验原理 ;减数分裂过程; 在适宜的时期采集植物的花蕾，经固定液杀死固定，使细胞保持活体时形态。然后进行压片染色等处理，在显微镜下进行观察，可以看到小孢子母细胞的减数分裂过程，研究染色体在形态和数量上的动态变化特点。;三、实验用品;四、实验操作流程 ; 1.取材： 选取适当大小的花蕾，是观察花粉母细胞减数分裂的关键性步骤。不同植物取材时期不同。 玉米：抽雄前两周（大喇叭口期），雄穗尖端露出以前7-10d时，先以手指挤摸穗尖的外部，觉得松软时在雄花序所在部位用刀片纵向划一切口，用镊子取出花序分枝。此时雄花序??端小穗颖长4mm左右，花药长2～3mm。每小穗中有两朵小花，各有花药3个 。通常从一个分枝上从幼嫩的部位向较为成熟的区域混合制片。 小麦：孕穗期以后，旗叶抽出1～ 2cm，取出穗子。 时间一般在上午9时～10时，不同材料间稍有差异。;玉米大喇叭口期;小麦孕穗期;2．固定： 取下的材料应立即放入固定液中杀死固定。 一般采用卡诺氏固定液，无水酒精：冰醋酸＝3:1，一般固定4~24h。可用95％ 乙醇代替无水乙醇。 如需长期保存，可先用70%酒精冲洗2次然后转入70%酒精中保存。 注意：固定液时应现配现用，固定时不要在阳光下暴晒。;3、剥离花药 取出保存的花序，吸去小穗过多保存液，置于载玻片中央，挑出花药;4．染色：;5.压片 盖上盖玻片，在盖玻片上垫1－2层吸水纸，用一只手稳住载玻片和盖片防止滑动，另一只手用解剖针的针柄敲击盖片;6.镜检观察 先用低倍镜观察，找到一个好的分裂相，再转用高倍镜观 察。要求能够分辨减数分裂的各个时期，特别是能够独立 辨认第一次减数分裂前期的各个时期 7.观察永久制片 在显微镜下观察，并与自己的制片比较，掌握各个时 期的特点。 注意： 怎样区分各个时期？;五、实验结果与分析;注意事项;减数分裂前期 I;粗线期;前???II;;玉米减数分裂中期I;前期 I;双线期;后期 I;前期 II;后期 II;取材及固定 捕捉雄性蝗虫，直接投入到卡诺固定液中固定24小时，然后转到70％的酒精中保存。;解剖取出精巢：先将蝗虫翅膀剪去，在翅基部的后方，相当于腹部背侧的前端，用解剖剪将其体壁剪开，上方两侧的黄色团块就是精巢。精巢由许多排列在一起的精小管组成。将精巢取出置于一洁净的培养皿内，用蒸馏水洗涤干净。用解剖针将精巢轻轻分离开，即可看到大量的精细小管。;取1－2根精小管放在干净的载玻片上，用吸水纸将上面的水吸净，在精小管位置上滴加一滴改良苯酚品红染液，在室温下染色10-15min。;附：显微镜操作和使用;调节目镜间 距和目镜微调