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【巩固2】 分离土壤中分解尿素的细菌,对培养基的要求是 ( )。 ①加尿素 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂 ⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸盐 ⑧不加硝酸盐 A.①③⑤⑦ B.②④⑥⑧ C.①③⑤⑧ D.①④⑥⑦ 解析 土壤中分解尿素的细菌能够合成脲酶,将尿素分解生成氨,利用尿素中的氮合成自身有机物。培养基中只加尿素,分解尿素的细菌能生长,其他微生物不能生长;分离微生物要用固体培养基;土壤中分解尿素的细菌属于异养微生物,需要加葡萄糖作为碳源。 答案 C 【巩固3】 用来判断选择培养基是否起到了选择作用,需要设置的对照是 ( )。 A.未接种的选择培养基 B.未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 C.接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D.接种了的选择培养基 解析 将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,因此,牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照遵循的是单一变量原则,所以与选择培养基一样接种、培养。 答案 C 【例1】 尿素是一种重要的农业肥料,但若不经过细菌分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,同学们试图探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如表所示,实验步骤如图所示。请分析回答问题。 微生物的分离 (1)培养基中加入尿素的目的是筛选________,这种培养基属于________培养基。 琼脂 15 g 尿素 1 g 葡萄糖 10 g MgSO4·7H2O 0.2 g Na2HPO4 2.1 g KH2PO4 1.4 g 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到100 mL (2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的_______和_____,实验需要振荡培养,原因是______________。 (3)转为固体培养基时,常采用________的方法接种,获得单菌落后继续筛选。 (4)下列材料或用具:①培养细菌用的培养基与培养皿;②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管;③实验操作者的双手。其中需要灭菌的是________;需要消毒的是________。(填序号) (5)在进行分离分解尿素的细菌的实验时,A同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只筛选出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有______。(填序号) ①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照 思维导图: 深度剖析 (1)培养基中加入尿素的目的是筛选尿素细菌。 (2)尿素可为尿素细菌提供氮源,震荡可为目的菌株提供氧气。 (3)在固体培养基中接种常用稀释涂布平板法和平板划线法。 (4)操作器械需灭菌,操作者双手需消毒。 (5)土样不同、培养基污染、操作失误均可能导致计数误差。 答案 (1)目的菌 选择 (2)尿素 葡萄糖 为目的菌提供氧气 (3)稀释涂布平板(平板划线) (4)①和② ③ (5)①②③ [思维拓展](1)利用选择培养基设计实验分离纯化微生物。 ①真菌:用含青霉素的培养基分离。 ②金黄色葡萄球菌:用含高浓度食盐水的培养基分离。 ③固氮微生物:用无氮培养基分离。 ④自养型微生物:用含无机碳源的培养基分离。 ⑤光合细菌:用含无机碳源的培养基在无氧而有光照的环境中分离。 ⑥厌氧型和兼性厌氧型微生物:用普通培养基在无氧条件下分离。 ⑦乳酸菌:用乳酸含量较高,pH较低的普通培养基分离。 ⑧假单胞杆菌:用石油作为唯一碳源的培养基分离。 (2)微生物分离与计数中两种对照组的作用: ①判断培养基中是否有杂菌污染,需将未接种的培养基同时进行培养。②判断选择培养基是否具有筛选作用,需设立牛肉膏蛋白胨培养基进行接种后培养,观察两种培养基上的菌落数目,进行对比得出结论。 【例2】 下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述中,错误的是 ( )。 A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板 B.取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平板上 C.将实验组和对照组平板倒置,37 ℃恒温培养24~48h D.确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 微生物的计数 思维导图: 深度剖析 确定对照组无菌后,选择菌落数在30~300的平板进行计数,D错;A是培养基的灭菌方法,B设置了一系列对照实验,C是细菌的培养方法,A、B、C三个选项均是正确的。 答案 D 单击此处进入 随堂达标检测 旁栏思考题 1.想一想,如何从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数? 答案 统计某一稀释度下平板上的菌落数,最好能统计3个平板,计算出平板上的菌落数的平均值,然后按课本旁栏
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