饮用水中微囊藻毒素的健康影响.pdf

饮用水中微囊藻毒素的健康影响 复旦大学公共卫生学院 环境卫生学教研室 概要  背景资料  环境和人群暴露水平  流行病学和毒理学研究结果  研究方向 背景资料 背景资料  水体富营养化  富营养化对水质的影响  富营养水体中的主要产毒藻类  与饮水水质相关的主要藻毒素 — 微囊藻毒素LR 水体富营养化 湖泊、水库等水域的植物营养成 分（氮、磷等）不断补给，过量 积聚，致使水体营养过剩的现象 称为水体“富营养化”。 滇池水华 富营养化引起的水质变化  藻类迅速繁衍  水质污浊发臭  透明度下降  感观性状恶化  水中溶解氧不足  鱼类及其他生物大量死亡  加速水域的消亡过程 产毒藻种 Microcystis Microcystis viridis M. wesenbergii aeruginosa Kuetz. (A.Br.)Lemm 产毒藻种 Anabaena Oscillatoria Nostoc 饮用水中的微囊藻毒素 饮用水中的微囊藻毒素 淡水中常见的蓝藻能产生神经毒素和肝毒 素，与供水安全相关。 大部分肝毒素是微囊藻毒素 (microcystins) ，已知70多种亚型的微囊藻 毒素，微囊藻毒素－LR 是最早被鉴定出来 也是最常见的亚型。 神经毒素在供水系统中不像肝毒素那样分布 广泛，造成的危害程度也不及微囊藻毒素。 MC-LR 环境暴露和人群暴露水平 环境暴露和人群暴露水平  分析方法  暴露水平 检测方法  生物测试法  蛋白磷酸酶分析法  酶联免疫吸附（ELISA ）  高压液相色谱（HPLC ）  液相色谱 – 质谱（HP －MS ） 生物测试法 生物测试法  方法：腹腔注射染毒，测其LD50  优点：快速筛查、可以区分毒素的毒作 用特征  缺点：灵敏度低、可比性差、不能定性 定量、一种毒素可能掩盖另一种毒素的 时相上较为延迟的严重毒性作用或致死 作用。 磷酸酶分析法 原理：PP 和PP 可强烈专一性促进糖原磷 1 2A 酸化酶 a的水解，而MCYST又可与PP1和 32 PP 共价结合，抑制其活性。据此，以 p 2A 标记糖原磷酸化酶 a，三者相互作用，根 据32p的释放量来测定样品中MCYST的含 量。 磷酸酶分析法  优点：检测限低（pg级），反应灵 敏，可检测样品中总MC的含量。  缺点：易受其它因素的影响 结果偏高：功能性测试 结果偏低：内源性蛋白磷酸酶活性 ELISA 原理：利用毒素诱发免疫反应产生抗 体，利用抗体对抗原的特异性识别来 对各种毒素进行检测。 微囊藻毒素的免疫学特点 微囊藻毒素的免疫学特点 MC是一个分子量仅 1kDa左右的半抗原， 只能与载体连接后才 能产生免疫反应，而 且这些小分子量的化 合物免疫动物后大多 只能得到单一位点的 抗体，因而导致单抗 的筛选难度很大。 ELISA 优点：检测限低（ng级），一般 灵敏度较高，适合作为筛检实验 检测样品中总MC的含量。 缺点：商品化的试剂盒来源有 限，有交叉反应，特异度变化较 大。 HPLC  固定相：C18硅胶柱  流动相：乙腈或甲醇等极性溶剂， 以TFA调节pH及离子对 检测器 1. 紫外(UV)检测 2. 荧光(FL)检测 3. 化学发光(CL)检测 HPLC 