第三章 紫外-可见光谱分析.ppt

测量方便，不需要更换吸收池 减少了光源强度不稳定性的影响 实现了快速自动吸收光谱扫描 2. 双光束分光光度计 旋转扇面镜，单色光被旋转扇面镜分成交替的两束光，分别通过样品池和参比池 ——将不同波长的两束单色光(λ1、λ2) 快束交替通过同一吸收池而后到达检测器。产生交流信号。无需参比池。△? = 1～2nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。 3. 双波长分光光度计 通过切光器使两束不同波长的光交替通过吸收池，测得吸光度差?A。 ?AB1和?AB2分别为在?1和?2处的背景吸收，当?1和?2 相近时，背景吸收近似相等。二式相减，得 这表明，试样溶液浓度与两个波长处的吸光光差成正比。 特点：不需参比液 (消除了由于参比池的不同和制备空白溶液等产生的误差) 。 单光束 双光束（空间分隔） 双光束（时间分隔） 特点： 因光束几乎同时通过样品池和参比池，因此可消除光源不稳产生的误差。 4. 多光道二极管阵列检测的分光光度计 ——光经全息光栅表面色散并投射到二极管阵列检测器上， 可在极短的时间内获得180—820nm的全光光谱。 二极管阵列分光光度计光路图 l.光源：钨灯或氘灯 2，5.消色差聚光镜 3．光闸 4．吸收池 6．入口狭缝 7．全息光栅 8．二极管阵列检测器 第三节 紫外-可见分光光度分析方法 一、 定性分析 qualitative analysis 有机化合物对紫外光具有吸收光谱特征：形状、峰的数目、波长位置及?max（化合物特性参数），可作为定性依据 反映结构中生色团、助色团特性，不能够完全反映分子特性。 ?结构相同的化合物一定具有相同的吸收光谱，但吸收光谱相同的却不一定是相同的化合物 对比法：试样与其标准品或标准谱图库：46000种 ?The sadtler standard spectra ,Ultraviolet? 1. 对比吸收光谱特征数据： 2. 对比吸光度的比值： A1 A2 = E1cl E2cl E1 E2 = 3. 对比吸收光谱的一致性： ?max ：是特征常数而加以区别 ?max ：峰、峰数、峰肩和峰谷 我国药典VB12的鉴别：1.70~1.88 = A361/A278；3.15~3.45=A361/A550 同样条件下，Overlay 二、单组分的定量分析 依据Beer定律： A = ? c b，物质在一定波长处的吸光度与它的浓度成正比 波长选择：无干扰处的?max处，一般躲开短波端的吸收峰，注意溶剂本身的吸收 1. 吸光系数法（绝对法）： c = A ? b ?、a或E可从手册查到 注意：当单色光不纯、仪器型号的差异等会带来较大误差 2. 校正曲线法（相对法）： 固定仪器、工作条件和测定条件，用待测物质的标准品配制一系列浓度不同的标准溶液，绘制A~c标准工作曲线。 在相同条件下测定样品溶液的A，从曲线上查或用线性方程计算样品溶液的c # 1 2 3 4 5 6 c 0 1.0 2.0 4.0 8.0 x A 0.00 0.102 0.198 0.385 0.732 0.456 Y=0.010+0.091X，R=0.9996 4.895mmol/L 3. 对照法（相对法）： 固定仪器、工作条件和测定条件，分别测量Ax和As： As= ? b cs Ax= ? b cx As Ax cx cs = Ax As cx cs = 四、紫外吸收光谱法用于有机化合物 分子结构的研究 有机化合物的紫外吸收光谱——可获得的结构信息 （4）共轭体系：200-250nm有强吸收峰(? ?104 )，K带?230nm 大?键，红移并吸收增强。???-不饱和醛酮：K带?240nm ，R带?310-350 nm。 （1）200-400nm 无吸收峰：饱和化合物，单烯 （2）含孤立助色团的饱和有机化合物： n → ?* 红移 （3）含孤立生色团的有机化合物： n →?* n →??* ? →? * 醛、酮 n→? * 跃迁产生的R带 确认?max，并算出 ㏒?，初步估计属于何种吸收带； 观察主要吸收带的范围，判断属于何种共轭体系； (3) 了解溶剂的极性与pH值的影响 光谱解析注意事项 （5）芳环的特征吸收：具有精细结构的特征 B 带，还有E1和E2带。 苯环增加取代基后，红移并吸收增大。 吸电子基和斥