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第七章 食品常见有害有毒物质的检测 第七章 食品常见有害有毒物质的检测 内容简介 本章讲述了食品食品中常见有害有毒物质如有机氯农药、有机磷农药、黄曲霉毒素等的测定方法以及各种测定方法的注意事项。 学习目的与要求： 1、掌握食品常见有害有毒物质如有机氯农药、有机磷苯农药残留及黄曲霉毒素等的测定操作方法 2、熟练使用气相色谱和液相色谱仪 重点：有机氯农药、有机磷苯农药残留及黄曲霉毒素等的测定操作方法、气相色谱和液相色谱仪的使用 难点：气相色谱和液相色谱仪的使用 一、定性检验 1、焰色法 2、亚铁氨化银试纸法 二、定量检验 采用气相色谱法 二、定量检验 1、农药提取 2、净化 3、测定 （1）气相色谱参考条件 色谱柱：内径3～4mm，长1.2～2m的玻璃柱，内装涂以OV-7（15g/L）和QF-1（20g/L）的混合固定液的80～100目硅藻土。 （2）电子捕获检测器 汽化室温度：215℃；色谱柱温度：195 ℃；检测器温度：225 ℃；载气（氮气）流速：90ml/min； （3）色谱图 （4）计算 一、定性检验 1、刚果红法 2、纸上斑点法 二、定量检测 采用气相色谱检测法 二、定量检测 1、标准溶液的配制 2、试样制备 3、有机磷农药提取 4、有机磷农药净化 5、测定 5、测定 （1）气相色谱条件； 色谱柱： ①玻璃柱2.6m×3mm （i·d），填装涂有4.5％DC200＋2.5％OV－17的ChromosorbWAW DMCS（80～100目）的担体。 ②玻璃柱2.6m×3mm（i·d），填装涂有 1.5％（质量分数）DCOE－1的Chromosorb WAW DMCS（60～80目） 气体速度：氮气（N2）50mL／min、氢气（H2）100ml/min、空气 50mL／min。 温度：柱温240℃、汽化室260℃、检测器270℃． （2）测定。吸取2～5μL混合标准液及样品净化液，注入色谱仪中，以保留时间定性。以试样的峰高或峰面积与标准比较定量。 6、结果计算 7、16种有机磷农药的色谱图 黄曲霉毒素，是一组化学结构类似的化合物。 已分离鉴定出12种，包括B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q、H1、GM、B2a和毒醇。 表1 中国对食品中黄曲霉毒素的最高允许含量 一、薄层层析法 1、仪器 小型粉碎机、样筛、电动振荡器、玻璃浓缩器、玻璃板5cm×20cm、薄层板涂布器、展开槽(25cm×6cm×4cm)、紫外光灯100—125W、波长365nm滤光片、微量注射器。 2、测定方法 (一)样品处理 (二)黄曲霉毒素提取 (三)测定 1．单向展开法 (1)薄板制备：称取3g硅胶G，加2～3倍量的水，研磨1～2min呈糊状后，倒入涂布器推成5cm×20cm，厚度约0.25mm的薄层板3块。在空气中干燥15min，在100℃活化2h，取出，放干燥器中保存。一般可保存2～3d，若放置时间较长，可再活化后使。 (2)点样 在距薄层板下端3cm的基线上用微量注射器或血红素吸管滴加样液。 第一点：10μl AFTB,标准使用液(0.04μg／ml)。 第二点：20μl 样液。 第三节：20μl 样液+10μL0.04μg／ml AFTB1　标准使用液。 第四点：20μl 样液+10μL0.02μg／ml AFTB1标准使用液。 (3)展开与观察 在展开槽内加10mL无水乙醚，预展12cm，取出挥干。再于另一展开槽内加10mL丙酮—三氯甲烷(8+92)，展开10～12cm，取出，在紫外光下观察结果. 方法如下： a．由于样液上加滴了AFTB1标准，可使AFTB1标准点与样液中AFTB1，荧光点重叠。若样液为阴性，薄板上第三点AFTB1为0.0004μg，可用作检查样液中AFTB1最低检出量是否正常出现；若样液为阳性；则起定性作用。薄层板上第四点AFTB1标准为0.002μg，主要起定位作用。 b．若第二点与AFTB1标准点的相应位置上无蓝色荧光点，则表示样品中AFTB1含量＜5μg／kg；若在相应位置上有蓝色荧光点，则需进行确证试验。 (4)确证试验：为确认薄层样上样液荧光系由黄曲霉毒素B1产生的，加滴三氟乙酸，产生AFTB1的衍生物，展开后此衍生物的比移值约在0.1左右。于薄层板左边依次滴加两个点。 第一点：10μL 0.04μg／mL AFTB1标准使用液。 第二点：20μL样液 于以上两点各加一小滴三氟乙酸盖于其上，反应5min后，用吹风机吹热风2min(板上温度不高于40℃)，再于薄层板上滴加以下两点。