姐妹染色单体互换.pptVIP

* * 实验二 姐妹染色单体互换标本制备与分析 湖北科技学院基础医学院 曾 洁 实验目的与要求 1、初步掌握姐妹染色单体差别染色技术 2、初步掌握SCE的观察及分析方法 3、了解SCE频率变化的意义 器材与试剂 1、材料 加BrdU的营养液培养的外周血淋巴细胞染色体标本片 2、器材用品 光学显微镜、恒温水浴箱、紫外灯、擦镜纸 3、试剂 2×SSC溶液、吉姆萨染液、BrdU、香柏油、二甲苯 实验原理 姐妹染色单体 （sister chromatid）：染色体在DNA复制之后产生的一对连在一起的染色单体。 姐妹染色单体互换（sister chromatid exchange, SCE）：是指染色体复制过程中，同一条染色体的两条姐妹染色单体在相同位置上发生的等位对称的片段交换（同源片段的交换）。 SCE交换频率是反映DNA损伤程度的最敏感指标之一。由于SCE能灵敏地检测染色体的变化，表现出剂量-效应关系，还可以将姐妹染色单体互换频率列为检测致突变物、致癌物的常规指标之一。 SCE检测原理：在细胞培养过程中，加入5-溴脱氧尿嘧啶核苷酸，当细胞的DNA复制时，BrdU可取代胸腺嘧啶而被掺入到新合成DNA链中。半保留复制的新链被BUdR掺入,当细胞处于第二周期时，同一染色体的两条姐妹染色单体，一条由双股都含有BrdU的DNA链构成