邯郸 转基因动物完整课件.ppt

胚胎干细胞法必需先获得嵌合体后代才能得到转基因动物，历经至少两代，杂交选育工作繁重，这对大动物如羊、牛等尤其不便，而且后代过度纯合可能导致胚胎早期死亡、畸形或者后代不育等。 如果结合核移植技术，将携带有外源基因的ES细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中，就能直接获得转基因动物，既节约了时间还能避开近交不育等纯种劣势。 胚胎干细胞法的特点 一般带有定点整合元件, 避免了随机整合 体外培养, 正-负选择, 相对较简单 需经过多代才能得到纯合的转基因动物，成本高 目前只在小鼠身上获得成功 3）逆转录病毒感染法 1974年Jaenisch等用逆转录病毒作为转基因载体，将SV40DNA 注入小鼠囊胚腔中，发现获得的小鼠体内SV40DNA整合 逆转录病毒侵染法是最早用来得到转基因小鼠的方法，利用逆转录载体将遗传信息以RNA分子的形式，在逆转录整合酶和逆转录基因组末端的特异性核酸序列的作用下，反转录并整合到宿主基因组中去，最终得到转基因小鼠 将目的基因重组到逆转录病毒载体上，制成高滴度病毒颗粒，人为感染着床前后的胚胎（也可直接将胚胎与能释放逆转录病毒的单层培养细胞共同培养以达到感染目的), 获得转基因动物的方法。 目前这种方法主要应用于鸡胚胎操作。　  逆转录病毒载体 外源基因 四/八细胞胚胎/囊胚/原肠胚 逆转录病毒感染 嵌合小鼠 纯合转基因小鼠 1）原理及过程