生物信息的传递上从DNA到RNA.pptVIP

● 概述（总体过程、基本概念） ● 转录起始：RNA聚合酶、启动子、增强子 ● 转录的基本过程 ● 转录后加工 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 一、基本概念 在细胞核内，以DNA的一条链为模板，按照碱基互补配对原则合成一条与DNA链互补的RNA单链的过程。 参与转录的物质 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板:DNA 酶: RNA聚合酶 其他蛋白质因子 转录的不对称性： 在RNA的合成中，DNA的二条链中仅有一条链可作为转录的模板，称为转录的不对称性。 转录单元（transcription unit） ● 基本概念 ● 转录起始： RNA聚合酶、启动子等 ● 转录的基本过程 ● 转录后加工 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 二、参与转录起始的关键酶与元件 （一)RNA聚合酶(RNApolymerase) 大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析 ● 真核生物RNA聚合酶 RNA聚合酶与DNA聚合酶的区别 （二） 启动子(promoter) ● 原核生物启动子结构 典型启动子的结构 -35 -10 转录起点 TTGACA 16-19bp TATAAT 5-9bp 原核生物不同基因的启动子的共同特点： 1）结构典型，都含有识别（R），结合（B）和起始（I）三个位点； 2）序列保守，如-35序列、-10序列结构都十分保守； 3）位置和距离都比较恒定； 4）对RNA聚合酶的亲和力高低影响转录频率和效率； 5）常和操纵子相邻； 6）都在其控制基因的5’端； 7）决定转录的启动和方向。 ● 真核生物启动子 启动子Ⅱ最为复杂，它和原核的启动子有很多不同 真核生物启动子的结构 1、核心启动子 ●定义：指保证RNA聚合酶Ⅱ转录正常起始所必需的、最少的DNA序列，包括转录起始位点及转录起始位点上游TATA区 2、上游启动子元件 ●包括CAAT盒（CCAAT）和GC盒（GGGCGG）等 真核生物启动子 与原核的启动子的区别： 1）多种元件：TATA框，GC框，CAAT框，OCT等； 2）不同元件的组合情况：位置、序列、距离和方向都不完全相同； 3）需转录因子参与转录的全过程：转录因子先和启动子结合，再与RNA聚合酶一起形成转录起始复合物，开始转录的过程。 增强子（enhancer） 能提高转录起始效率的序列被称为增强子或者强化子。增强子可位于起始点的5’或3’末端，而且一般与所调控的靶基因的距离无关。 增强子的特点： ① 具有远距离效应。常在上游-200bp处，但可增强远处启动子的转录，即使相距十几Kb也能发挥其作用； ② 无方向性。无论在靶基因的上游，下游或内部都可发挥增强转录的作用； ③ 顺式调节。只调节位于同一染色体体上的靶基因，而对其它染色体上的基因无作用； ④ 无物种和基因的特异性，可以接到异源基因上发挥作用，如将SV40的增强子接到兔β-珠蛋白基因前，引入Lela细胞，此珠蛋白基因转录增强200倍。 ⑤ 具有组织的特异性。 增强子的效应需特定的蛋白质因子参与。 ⑥ 有相位性。其作用和DNA的构象有关。 ⑦ 有的增强子可以对外部信号产生反应。如热体克基因在高温下才表达。编码重金属蛋白的金属硫蛋白基因在镉和锌存在下才表达。某些增强子可以被固醇类激素所激活。 （三） 转录起始复合物 ● 原核生物转录起始复合物 真核生物RNA聚合酶Ⅱ所形成的转录起始复合物 因子 分子量 功能 RNAPolⅡ≥500K 依赖模板合成RNA TFⅡA 12,19,35K 稳定TBP和TFⅡB与启动子的结合稳定 TFⅡB 33K 结合TBP ，吸引PolⅡ和TFⅡF相互作用到启动子上 TFⅡD 30K 与各种调控因子相互作用 TFⅡE 34K 吸引TFⅡH，有ATP酶及解链酶活性 TFⅡF 74K 大亚基具解旋酶活性（RAP74）, 38K 小亚基RAP38和PolⅡ结合，并在TFⅡB帮助下阻止RNA聚合酶 与非特异性DNA序列相结合 TFⅡH 具激酶活性，可磷酸化PolⅡ，使PolⅡ逸