番茄14-3-3蛋白九tft7在缺铁响应中的作用.docxVIP

浙江大学 硕士学位论文 番茄14--3--3蛋白（TFT7）在缺铁响应中的作用 姓名：陈丽茜 申请学位级别：硕士 专业：植物学 指导教师：郑绍建浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 摘要 摘要 铁是植物生长发育必需的微量元素。由于土壤中铁的生物有效性普遍较低， 缺铁是限制全球农业生产的重要因素之一。植物缺铁时会产生各种生理和分子机 制来增加土壤中铁的生物有效性和增强根部的铁吸收能力。番茄缺铁时，先通过 高铁还原酶FR01将Fe3+还原成Fd+，后Fd+经转运蛋白IRTl转运入根部。FER 编码bHLH蛋白，是一类转录因子，在转录水平和转录后水平调控FR01和腰刀。 目前对于FER是如何感知缺铁信号、如何受到调控以及高铁还原酶活性(FCR， Ferric Chelate Red_uctasel如何受到调控知之甚少。万刀基因的表达受到缺铁诱 导，为了进一步了解其分子调控机理，我们采用病毒诱导的基因沉默(VIGS)的方 法研究了J4—3—3基因(嘲在番茄缺铁响应中的作用。用烟草花叶病毒介导的 』彳．3．3基因(翮沉默载体，以农杆菌为媒介侵染番茄获得基因沉默植株。结果 表明，在缺铁条件下，J4—3．3基因(网沉默后，根部高铁还原酶活性明显降低， 同时FR01基因表达也下调，侧根根尖膨大和根毛的形成受到抑制。该结果证明 了14．3．3蛋白在转录水平和转录后水平调控缺铁诱导的高铁还原酶活性，并且 能促进根尖膨大和根毛的形成。 J74．3．3基因(册沉默后，FER基因的表达量也相应下调。有趣的是，番茄 T3238fer突变体中，无论是正常或缺铁处理下，阿刀基因表达量都下调。通过 酵母双杂技术，发现二者并不能互作。因此，我们推测砑刀、FER之间存在反 馈调节机制来互相调节表达。另外，我们认为可能有第三种因子能与TFT7、FER 或者分别与其中之一相互形成复合物来调控下游的响应。 综上，我们证明了，彳一3．3基因(卿确实在缺铁响应中起作用，在转录水平 和转录后水平调控缺铁诱导的高铁还原酶活性，促进根尖膨大和根毛的形成，与 FER互相反馈调控或者与FER和(或)第三种因子形成复合物调控缺铁信号途 径。 【关键词】14．3．3蛋白，万刀基因，FER基因，FR01基因，病毒介导的基因 沉默，缺铁信号响应，高铁还原酶活性，酵母双杂 IlI 浙江大学硕士学位论文 浙江大学硕士学位论文 Abstract Ab stract Iron is one of the essential micro-nutrients for plant，and iron(Fe)deficiency constitutes one of the major limitations for crop production in calcareous soils．Plants employ a number of responses to Fe deficiency including some specific physiological and molecular actions廿lat can either increase Fe bioavailability in the soils or enhance the root capacity to uptake Fe．In tomato，reduction of ferric iron is mediated by iron reductase FRO1 and subsequent uptake of ferrous iron into root epidermis by the metal transporter IRT 1．The bHLH transcription factor FER is required for the regulation of FR01 and IⅪ1．However,the signaling pathway leading to the activation of ferric chelate reductase(F