荧光蛋白的研究进展与应用-动物营养学报.pdf

动物营养学报２０１３，２５（２）：２６８２７４ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｉｍａｌＮｕｔｒｉｔｉｏｎ 　 ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００６２６７ｘ．２０１３．０２．００６ 荧光蛋白的研究进展与应用 １，２ ２ ２ ３ １ 高权新 　王进波 　尹　飞 　马向明 　施兆鸿 （１．中国水产科学院东海水产研究所，农业部东海与远洋渔业资源开发利用重点实验室，上海 ２０００９０；２．浙江大学 宁波理工学院，分子设计与营养工程重点实验室，宁波 ３１５１００；３．中国石油大学 国家大学科技园管理委员会，东营 ２５７０９１） 摘　要：绿色荧光蛋白（ｇｒｅｅｎｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＰ）于１９６２年被发现，由于它可以发出稳定 的荧光，不具有物种专一性，且易于在细胞内表达，已作为标记物广泛地应用于生命科学领域。 本文对荧光蛋白的发现、作用机理及其应用进展进行了综述。最后，本文阐述了ＧＦＰ在动物营 养相关领域的研究和应用。 关键词：绿色荧光蛋白；作用机理；研究应用 中图分类号：Ｓ８５２．１　　　　文献标识码：Ａ　　　　文章编号：１００６２６７Ｘ（２０１３）０２０２６８０７ 　　荧光蛋白已在生命科学领域被广泛利用，成 成，第６５、６６、６７位氨基酸（ＳｅｒＴｙｒＧｌｙ）形成发光 为了当今生物学研究者强有力的帮手。科学家们 团，经共价键连接而形成对羟苯甲基咪唑烷酮，可 利用这一先进的工具，在整个生物学界掀起了生 被光激发产生荧光［３－４］。许多科学家利用荧光蛋 物技术革命，比如利用三磷酸鸟苷（ＧＴＰ）标记脑 白的发光机理，将水母中荧光蛋白基因提取出来， 组织，可以监控脑神经细胞的生长等，这无疑是生 转入其他生物体内，使得生物变幻的多姿多彩。 ［５］ 物学史上的奇迹。本文阐述了荧光蛋白的发现、 ２０００年，荧光兔（图２）在法国诞生 ，随后荧光猫 ［６］ ［７］ 发展及利用，展示了荧光蛋白空前的显像技术及 （图３） 、荧光鼠（图４） 相继问世。２００６年 １２ 其他一系列强大的功能，概括了在动物营养相关 月２４日，东北农业大学的刘忠华教授主持的转基 ［８］ 领域的研究进展，以期为我国的生物学以及动物 因克隆猪课题获得成功（图５） 。 营养学研究者提供新的思路和方法。 ２　ＧＦＰ在生物领域的最新应用进展 １　荧光蛋白的发现及其作用机理 ２．１　显像技术 　　１９６２年，下村修在一种生活在北冰洋寒冰水 　　由于荧光蛋白有多种颜色，且稳定、无毒，所 域的水母———维多利亚多管水母（Ａｅｑｕｏｒｅａｖｉｃ 以荧光蛋白可使得动物体内复杂的系统结构可视 ［９］ ｔｏｒｉａ，图１）体内发现了绿色荧光蛋白（ｇｒｅｅｎｆｌｕｏ 化。Ｌｉｖｅｔ等 用多种不同颜色的荧光蛋白对神经 ｒｅｓｃｅｎｔｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＰ），并纯化了ＧＦＰ。马丁 ·沙尔 系统进行了基因标记，使得我们能够观察到大脑 菲发现了ＧＦＰ的价值，并第 １次运用 ＧＦＰ这个神 的集成线路图，可以直观地看到神经细胞以及细 奇工具投入试验研究。１９９４年钱永健改造了