第四章离子色谱分析法.ppt

§4 色谱分离法(chromatography) § 4.1 基本原理 色谱法是一种物理化学分析方法。根据所用样品混合物中各组分物理、化学性质的差异，各组分程度不同的分配到互不相溶的两相中。当两相相对运动时，各组分在两相中反复多次重新分配，结果使混合物得到分离。 固定相：固定不动的一相 流动相：移动的一相 § 4.2 色谱法的分类 1)根据流动相分类: 气相色谱—以气体作流动相 液相色谱—以液体作流动相 超临界色谱—流动相是在接近它的临界温度和压力下工作的液体 2)根据固定相的附着方式分类 —固定相装在圆柱管中—柱色谱—固定相涂敷在玻璃或金属板上—薄膜 色谱（平板色谱）—液体固定相涂在纸上—纸色谱(平板色谱) 3) 根据分离机理分类 分配色谱—样品组分的分配系数不同吸附色谱— 样品组分对固定相表面吸 附力不同体积排阻色谱—利用固定相孔径不同， 把样品组分按分子大小 分开离子交换色谱—不同离子与固定相商相 反电荷间的作用力大 小不同 气相色谱仪的流程 I -载气系统; II -进样系统; III-色谱柱和柱箱; IV-检测系统; V -记录系统 液相色谱仪的流程 § 4.3 离子色谱分析法 一、离子色谱法(IC)的优点 二、离子色谱法的局限性 三、离子色谱法的基本原理 （一）、IC的分离原理 （二）、电导检测器和抑制柱作用原理 四、应用示例 § 4.4 纸色谱法(Paper chromatography) 将固定相放在纸上，以纸做载体进行点样、展开、定性、和定量的液-液分配色谱法 固定相：纸纤维吸附的水 流动相：与水不互溶的有机溶剂（饱和正丁醇） 分离机制：同液-液分配色谱 定性参数： Rf值测量示意图 L0 一、比移值的作用及影响比移值的因素 例：分离K+、Rb+、Cs+，可用盐酸饱和的苯酚作流动相，其Rf值分别为：K+ 0.19, Rb+ 0.26,Cs+ 0.48;若用苯酚-甲醇-盐酸作流动相，则其Rf值分别为：K+ 0.00, Rb+ 0.19,Cs+ 0.46;请问哪种体系的分离效果好，为什么？ 前一体系：ΔRf(Rb+ - K+)=0.26-0.19=0.07 ΔRf(Cs+ - Rb+)=0.48-0.26=0.22 后一体系：ΔRf(Rb+ - K+)=0.19-0.00=0.19 ΔRf(Cs+ - Rb+)=0.46-0.19=0.27 两元素的Rf相差越大，越易分离，所以第二种分离效果好。 例2：在某一溶剂体系中，A元素的 Rf值为0.40，B元素的Rf值为0.50，今欲将它们分开，若两斑点的直径均为1cm,要求相隔1cm，（即两斑点中心的距离为2cm），问应取多长的泸纸？ A斑点的Rf=a/c=0.40, B斑点的Rf=b/c=0.50 a=0.40×c b=0.50×c b-a=2=0.50×c-0.40×c=0.10c c=20cm 20+4+3=27cm 二、薄层色谱法 （一）薄层板的制备方法 三、薄层色谱与纸色谱的比较及应用 § 4.5 生物大分子的色谱分离法 生物大分子的色谱分离法 § 4.6 膜分离技术与生物试样分离1. 透析 ——超滤分离技术 用于透析的半透膜应具备的条件 2. 透析的装置与方法 透析过程注意点： 3. 超滤 4. 超滤装置与应用 应用： § 4.7 气浮分离法原理 采用某种方式，通入水中大量微小气泡，在一定条件下使呈表面活性的物质吸附或粘附于上升的气泡表面而浮升到液面，从而使某组分得以分离的方法—浮选分离法或泡沫浮选分离法。 气浮分离法原理 § 4.8 固相微萃取分离法(Solid-phase microextraction) 原理 将涂有高分子固相液膜的石英纤维插入试样溶液或气样中,对待分离物质进行萃取,经过一定时间在固定相涂层和水溶液两相中达到分配平衡,从而使待测物质分离.是一种非溶剂型萃取法. 直接固相微萃取分离法 顶空固相微萃取分离法 § 4.9 毛细管电泳分离法 1.电泳:荷电物质在电场中因受到吸引和排斥而引起的差速流动. 2.电泳分离:是依据在电场中溶质不同的迁移速率. 3.毛细管电泳分离原理:在充有电解质的毛细管两端施加高电压，利用电位梯度和离子淌度的差别，实现流体中组分的电泳分离。其分离机理有： 静电或离子相互作用、氢键作用、空间位阻作用、偶极-偶极相互作用、π-π相互作用 毛细管电泳仪器结构示意