几种草莓优良品种组培快繁与脱毒苗生产技术探究.docxVIP

几种草莓优良品种组培快繁与脱毒苗生产技术探究.docx

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几种草莓优良品种组培快繁与脱毒苗生产 技术探究 摘要:以7个草莓优良栽培品种的匍匐茎为起始 材料,试验出以MS为基本培养基附加BA 0 . 5 mg/ L诱导 草莓匍匐茎芽和茎尖植株再生、增殖、生根的培养基,确立 了草莓组培快繁技术方法,同时探讨低成本下草莓试管苗的 快繁技术,不仅能快速培养出大量脱毒苗,而且能取得较好 的社会和经济效益。 关键词:草莓;组培快繁;茎尖脱毒;生产应用 草莓(Fragaria ananassa D.)是蔷薇科草莓属多年生 常绿草本植物,其果品富含蛋白质、有机酸、维生素以及磷、 钙、铁、锌等矿物质,是营养丰富、经济价值很高的上等果 品。除了鲜食,草莓也是加工果酱、果酒等的重要原料,在 世界浆果类水果生产中,其栽培面积和产量仅次于葡萄[1]。 我国草莓生产发展迅速,近几年来栽培面积迅速扩大, 已经成为栽培草莓最多的国家之一。草莓的种苗生产传统上 采用匍匐茎繁殖和分株繁殖,而长期使用无性繁殖方法会使 草莓品种退化,病毒感染严重[2]。利用草莓茎尖培养快繁 技术可部分或全部脱除病毒,保持草莓品种的优良性状, 提高产量;繁殖快,对新品种的推广有利,快速繁殖不受季 节影响,一年四季均可进行。在人工控制的条件下,可工厂 化育苗,根据生产需要为生产提供种苗。近些年,我们进行 了大量的研究,以期能快速繁殖并培育出优良草莓品种,同 时探讨低成本下草莓试管苗的快繁技术。 1材料与方法 1.1材料 选取的材料C1-C7全部为当前草莓优良栽培品种,市 场应用推广价值高,由新疆生产建设兵团阿拉尔现代农业示 范区核心区十团苗木基地提供。 1. 2方法 1.2. 1培养基的配制。用于草莓匍匐茎芽和茎尖培养诱 导芽分化的基本培养基为MS附加6-BAO. 5mg/L,蔗糖30g/L, 琼脂粉5. Og/L, pH值调至5. 8。在草莓扩繁阶段,采用MS 培养基附加6-BA 0. 5 mg/L. NAA 0. Olmg/L,所用培养基中 以3 %食用白砂糖代替蔗糖,加琼脂粉0. 5%,以自来水代替 蒸馆水,pH值在高压灭菌前调至5. 8。 1.2.2材料的消毒与处理。选取健壮草莓母株上生长充 实而小叶尚未展开的匍匐茎顶端约3?4cm长的芽,用自来 水冲洗2?3 h后,在超净台上进行灭菌处理。先用小蹑子 将匍匐茎的外部大叶摘除,再用75%酒精处理30s,然后置 于0. 2%的升汞中消毒3?6 m,再用无菌水冲洗3?4遍。 1.2.3诱导分化与增殖。(1)以草莓匍匐茎芽为试材, 以附加BA 0. 5mg/L的MS培养基诱导和增殖草莓小苗,每瓶 接种3个材料。(2)在双筒解剖镜下由外向内逐层剥去幼叶, 直至半圆球的顶端分生组织充分暴露出来, 直至半圆球的顶端分生组织充分暴露出来, 切取0. 5 mm左 右大小茎尖接种于附加BAO. 5mg/L的MS培养基上诱导培养, 每瓶接种1个材料。 接种后移至培养室内培养。培养条件为光照1500?2500 lx , 14h/d,温度(25±1) °C o把诱导分化出的草莓小苗 转接入继代增殖培养基,培养基成分同诱导分化培养基。转 接时把芽团分细小些,约5株/瓶,30 d左右继代1次,记 录组培苗的增殖情况。 1.2.4扩大繁殖。将丛生苗分块即每5?7株切成一块, 转入继代培养基。在转苗过程中,去掉原生叶片有利于新苗 分化,在扩大繁殖中随时清除愈伤组织,有利于新苗增殖和 生长。 1.2.5生根与移栽。将生长健壮,苗高2?3cm的试管 苗移到生根培养基(1/ 2 MS + IBAO. lmg/L)上生根,30d 后移栽。 2结果与分析 2. 1不同消毒时间,不同接种部位对草莓出芽率诱导分 化的影响 由表1可知,所选取的7种草莓优良品种匍匐茎不同部 位经清洗消毒后接种均能获得无菌试管苗,结果表明,匍匐 茎出芽率上段〉中段〉下段,这与顶端分生组织生长旺盛有 关。Cl, C2, C3, C4, C5” 5个品种通过切取茎尖技术培 育草莓无菌试管苗均获得无菌试管苗,不同品种的芽诱导率 不同,茎尖出芽率C3C5C2〉C4〉C1, C3最高70%, C1最低 30 %o在同一培养基上,15d后观察以0.2%升汞处理4m较 为适宜,成活率较高。 2.2匍匐茎芽和茎尖诱导分化培养观察 将匍匐茎芽接种到诱导培养基上,2?3d芽变绿,开始 生长,7?10d后伸长至lcm左右,将芽切下转移至增殖培养 基(同诱导培养基)培养,20d后即可看到叶原基形成可见 的小叶,30?40d后可长成具有数片真叶的幼苗。将茎尖接 种到诱导分化培养基上,14d后颜色逐渐变绿,基部逐渐膨 大。30d后,即可看到明显伸长的小茎,叶原基也形成可见 的小叶,50d后可长成具有数片真叶的幼苗。 2.3增殖培养观察 将诱导分化出的草莓小芽接种于增殖培养基上(

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