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1966 Nirenberg,Ochoa,Khorana,Crick等人破译了全部遗传密码。 1967 第一次发现DNA连接酶 1970 Smith,Wilcox和Kelley分离了第一种限制性核酸内切酶,Temin和Baltimore从RNA肿瘤病毒中发现反转录酶。 1972-1973 Boyer,Berg等人发展了DNA重组技术,于72年获得第一个重组DNA分子,73年完成第一例细菌基因克隆。 1975-1977 Sanger与Maxam和Gilbert等人发明了DNA序列测定技术,1977年完成了全长5387bp的噬菌体φ174基因组测定。 1978 首次在大肠杆菌中生产由人工合成基因表达的人脑激素和人胰岛素。 1980 美国联邦最高法院裁定微生物基因工程可以被专利化。 1981 Palmiter和Brinster获得转基因小鼠,Spradling和Rubin得到转基因果蝇。 1982 美、英批准使用第一例基因工程药物——胰岛素,Sanger等人完成了入噬菌体48,502bp全序列测定。 1983 获得第一例转基因植物。 1984 斯坦福大学获得关于重组DNA的专利。 1986 GMO首次在环境中释放。 1988 Watson出任“人类基因组计划”首席科学家。 1989 DuPont公司获得转肿瘤基因小鼠—“Oncomouse”。 1992 欧共体35个实验室联合完成酵母第三染色体全序列测定(315kb)。 1994 第一批基因工程西红柿在美国上市。 1996 完成了酵母基因组(1.25×107bp)全序列测定。 1997 英国爱丁堡罗斯林研究所获得克隆羊。 2000 完成第一个高等植物拟南芥的全序列测定((1.15×108bp)。 2001 完成第一个人类基因组全序列测定(2.7×109bp)。 1.3 重组DNA技术与基因工程的基本概念 1.3.1 重组DNA技术的基本定义 1.3.2 基因工程的基本定义 1.3.3 重组DNA技术与基因工程的基本用途 1.3.4 基因工程的基本形式 1.3.1 重组DNA技术的基本定义 重组DNA技术是指将一种生物体(供体)的 基因与载体在体外进行拼接重组,然后转入 另一种生物体(受体)内,使之按照人们的 意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的 DNA体外操作顺序,也称为分子克隆技术。 因此,供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。 1.3.2 基因工程的基本定义 基因工程是指重组DNA技术的产业化设计与 应用,包括上游技术和下游技术两大组成部 分。上游技术指的是基因重组、克隆和表达 的设计与构建(即重组DNA技术);而下游 技术则涉及到基因工程菌或细胞的大规模培 养以及基因产物的分离纯化过程。 1.3.3 重组DNA技术与 基因工程的基本用途 分离、扩增、鉴定、研究、整理生物 信息资源 大规模生产生物活性物质 设计、构建生物的新性状甚至新物种 1.3.4 基因工程的基本形式 第一代基因工程 蛋白质多肽基因的高效表达 经典基因工程 第二代基因工程 蛋白质编码基因的定向诱变 蛋白质工程 第三代基因工程 代谢信息途径的修饰重构 途径工程 第四代基因工程 基因组或染色体的转移 基因组工程 1.4 重组DNA技术与基因工程的基本原理 1.4.1 重组DNA技术的理论基础 1.4.2 基因的分子生物学 1.4.3 基因工程的基本原理 1.4.4 基因工程的支撑技术 1.4.1 重组DNA技术的理论基础 19世纪中 孟德尔 豌豆杂交试验 遗传因子 经典遗传学 20世纪初 摩尔根 果蝇杂交试验 基因
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