高分辨质谱鄄非信息依赖数据采集鄄后靶向筛查策略在不明原因食物.pdf

第46卷 分析化学 (FENXI HUAXUE)摇 研究报告 第2期 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2018年2月 ChineseJournal of Analytical Chemistry 157~164 藡蕥蕥蕥蕥蕥蕥蕥蕥藡蕥蕥 DOI:10.11895/j.issn.0253鄄3820.171139 研 究报 告 藡蕥蕥蕥蕥蕥蕥蕥蕥 藡 高分辨质谱鄄非信息依赖数据采集鄄后靶向筛查策略 在不明原因食物中毒鉴定中的应用 * * 张美娟摇 陈佳摇 林 缨摇 张雅姣摇 郭 磊摇 徐 斌 摇 谢剑炜 (军事医学科学院毒物药物研究所,抗毒药物与毒理学国家重点实验室,北京 100850) 摘摇 要摇 基于超高效液相色谱鄄四极杆鄄飞行时间串联质谱(UPLC鄄QTOF MS/ MS)技术,建立了高分辨质谱鄄非 信息依赖数据采集鄄后靶向筛查策略(HRMS鄄DIA鄄Post targeted screening strategy),并成功应用于不明原因食物 中毒患者呕吐物及粪便样本中的有毒化合物筛查鉴定。 样品经溶剂提取与净化后,采用5 mmol/ L 甲酸铵鄄水 E (A)和0.1%甲酸鄄乙腈(B)作为流动相,在反相色谱柱上进行梯度洗脱。 采用 MS 模式对样品进行质谱 (ESI+)全信息采集,经UNIFI筛查软件进行谱峰识别、谱库检索等数据分析,初筛出疑似有毒化合物琢鄄茄碱, 随后结合其化合物特征及体内代谢行为,采用后靶向筛查策略在两种样品中均鉴定出相关化合物(包括水解 产物及代谢产物等),如琢鄄卡茄碱与其水解产物茁鄄卡茄碱、酌鄄茄碱/ 卡茄碱以及共同代谢产物茄啶。 采用单点 校正法测得两种样品中琢鄄茄碱含量均约为0.1mg/ kg,采用峰面积归一化法得到两种样品中龙葵素类似物总 量分别约为0.5 mg/ kg与0.6 mg/ kg。 本研究建立的高分辨质谱快速筛查策略可为不明原因食物中毒的未知 毒物快速筛查鉴定提供有效的技术手段。 关键词摇 后靶向筛查;未知有毒化合物;高效液相色谱鄄四极杆鄄飞行时间串联质谱;生物医学样品;龙葵素 1摇 引言 [1,2] 近年来,我国食物中毒事件时有发生,严重危害着广大民众的身心健康 。 按照致病因子计,常 见食物中毒可分为微生物性(包括细菌、真菌和病毒等)、化学性、有毒动植物及不明原因中毒四类。 2015年我国食物中毒事件共发生169 起,中毒5926人、死亡121人;其中化学性毒物中毒事件23起。 中 [2] 毒597人、死亡22人,化学性毒物中毒死亡人数占全年毒物中毒死亡数的18.2% 。 因此,发展快速高效 的未知有毒化合物筛查鉴定技术与策略,有助于食物中毒相关的法医学鉴定以及临床快速诊断和救治。 色谱鄄质谱技术是目前有毒有害化合物筛查鉴定以及定量分析的主要技术手段之一,在与气相色谱 (GC)、液相色谱(LC)等快速分离技术联用时,以飞行时间质谱(Time of flight鄄mass spectrometry,TOF鄄 MS)为代表的高分辨质谱,具有较高的质量分辨率及较快的扫描速度,使每个色谱峰均能采集到足够的 数据点和化合物信息量,为快速样品筛查鉴定提供了有效的技术手段,目前已被成功应用于食品及生物 [3] 样品中