化学制药工艺学第十三章地塞米松生产工艺.ppt

以剑麻皂素为原料的合成路线 地塞米松的合成 1）D环的修饰：通过格式反应、过氧酸氧化和水解三步完成。 以剑麻皂素为原料的合成路线 地塞米松的合成 2）C-21位羟基的引入：完成D环修饰的产物可通过C-21位的溴化、取代成酯得到16α-甲基-3β,17α,21-三羟基-5α-孕甾-20-酮-21-乙酸酯，实现C-21位羟基的引入。 以剑麻皂素为原料的合成路线 地塞米松的合成 3）A环的修饰：A环的修饰可通过微生物转化一次完成，大大提高了合成效率。 以剑麻皂素为原料的合成路线 地塞米松的合成 4）地塞米松的合成：将所得A、D环完成修饰的中间体采用蓝色犁头酶转化得到11β-羟基化合物后，将其消去得到含C9,11双键的中间体，再通过双键加成、环氧化、氟代开环和水解等步骤，完成地塞米松的制备。 以剑麻皂素为原料的合成路线 地塞米松的合成 4）地塞米松的合成 第三节 地塞米松的生产工艺原理及其过程 一、11β-羟基-16α,17α-环氧-孕甾-4-烯-3,20-二酮的制备 1. 工艺原理 一、11β-羟基-16α,17α-环氧-孕甾-4-烯-3,20-二酮的制备 2. 工艺过程 在土豆斜面培养基上接种蓝色犁头霉菌，并于28 ℃下培养4 ~ 5天。待孢子成熟后，用无菌生理盐水将其制成孢子悬浮液，并以一定比例接入种子罐，28 ℃下培养28 ~ 32小时。待培养液pH值达到4.2 ~ 4.4，菌体浓度达35%以上时，若镜检无杂菌且菌丝粗状便可转入发酵罐，28 ℃下搅拌通气培养约10小时。用20%氢氧化钠溶液将pH值调至5.5 ~ 6.0，然后投入16α,17α-环氧-孕甾-4-烯-3,20-二酮溶液进行生物转化，并定期取样做比色分析。大约24小时后，反应接近终点并达到放罐要求后，放料，料液经过滤或离心除去菌丝体，滤液用乙酸丁酯提取数次。将提取液合并、浓缩、冷却、过滤、干燥后，可得产物。 一、11β-羟基-16α,17α-环氧-孕甾-4-烯-3,20-二酮的制备 3. 工艺条件及影响因素 目前，国内一般选用蓝色犁头霉菌AS 3.65作为工业生产菌株，但由于其C11-β-羟化酶活力以及氧化专一性不强，转化过程中伴有不少副产物生成，如C11-α-羟化物和其他羟化物。 一、11β-羟基-16α,17α-环氧-孕甾-4-烯-3,20-二酮的制备 3. 工艺条件及影响因素 蓝色犁头霉菌发酵工序影响因素较多，我国所采用的工艺转化率在45%左右，而国际先进水平在80%以上。此外，我国的发酵工艺中投料浓度偏低，致使生产效率不高。 底物是一种疏水性甾体化合物，水溶性较差，且与微生物细胞的接触不好，导致转化率偏低，发酵时间较长。若采用加入丙二醇、乙醇等传统方法，则会产生对微生物细胞的毒害，故用量有限。因此，通常在生产中将底物微粒化后增加比表面积，以增加其在发酵液中的溶解度。 二、11β-羟基-16α,17α-环氧-孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮的制备 1. 工艺原理 ★ 转化过程 二、11β-羟基-16α,17α-环氧-孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮的制备 2. 工艺过程 将简单节杆菌接入发酵罐内进行二级培养，20小时后测定菌量、pH值和酶活力等，如均属正常，称取11β-羟基-16α,17α-环氧-孕甾-4-烯-3,20-二酮，用乙醇溶解后投入发酵罐内。48小时后，取样分析，若反应完全，即可放料，并用乙酸丁酯提取发酵液数次。将提取液合并、浓缩、冷却、过滤、干燥后，可得11β-羟基-16α,17α-环氧-孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮。 二、11β-羟基-16α,17α-环氧-孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮的制备 3. 工艺条件及影响因素 简单节杆菌的种子培养阶段不可染菌，在发酵前期亦应保证无杂菌。当转化开始（即脱氢阶段）时若染菌，可视情况继续运转。此外，用于投料的基质颗粒应细，从而增加其表面积，提高溶解度。 经简单节杆菌转化时，Co2+离子的加入对产物的积累起决定性作用，因其是简单节杆菌Δ1,4脱氢反应的有效甾核降解酶（9α-羟化酶）的抑制剂。 甾体的微生物转化若采用溶媒法，则可能对菌种产生毒害作用。 三、16α,17α-环氧-孕甾-1,4,9(11)-三烯-3,20-二酮的制备 工艺原理——维尔斯迈尔-哈克-阿诺德反应 ★ 反应机理 三、16α,17α-环氧-孕甾-1,4,9(11)-三烯-3,20-二酮的制备 工艺过程 反应罐内加入11β-羟基-16α,17α-环氧-孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮和N,N-二甲基甲酰胺，冷却至-80 ℃ ~ -70 ℃，30分钟内加入五氯化磷。加入完毕后，升温至-50 ℃ ~ -45 ℃，反应3 ~ 4小时。加水，控制体系温度为-20