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进修生日志：primer BLAST 在线设计引物扩增未知菌种 1 2 兰会华 整理 屈平华 审校 1 广西壮族自治区人民医院检验科， 2 广东省中医院检验科 PCR 的第一步就是引物设计。引物设计的好坏，直接影响PCR 的结果。引 物设计的软件很多，但是，多数时候是引物设计出来了，PCR 也能扩增到目的 条带，但非特异性的条带好几条，甚至比目的条带还要亮的，郁闷的有木有？再 有，分离到一个新菌种，要扩增管家基因或蛋白基因，可引用参考文献的引物， 却怎么也扩增不出来，泪奔的有木有？小编在这里给大家介绍利用细菌的全基因 组序列，以primer BLAST 在线设计引物和PCR 扩增新菌种的方法，让您找到高 大上的感觉。 一、实验目的：设计属特异性引物PCR 扩增一未知菌弗朗西斯菌的sdhA 基因 二、引物设计过程 （一）获得目的基因序列 1、进入NCBI ，点击gemone，搜索待扩增菌的属名Francisella 2 、点击search，结果得了相关菌种的全基因组序列。 2 、点击其中的一个全基因组