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与细胞衰老和癌变 周俊宜 中山医科大学生化教研室 主要内容 端粒的结构与功能 端粒酶的结构与功能 端粒、端粒酶与细胞衰老 端粒、端粒酶与恶性肿瘤 1）早期的原始复制模型 2）端粒酶模型 3）重组模型 6 端粒的复制模型 酵母细胞 酵母细胞 酵母TS 四膜虫TS Shampay的加尾实验 1 端粒酶的发现 Blackburn的实验 加热或蛋白酶 孵育 四GT 酵GT pBR322 四CA 孵育 四膜虫抽提物 5’ 3’ 1）端粒的加尾方向是按GT链从5’端 3’端。 2）每次加一个重复单位。 3）似为无模板复制。 4）被加尾的末端序列具有特异性。 5）催化加尾的应是细胞抽提物中一种具有酶活性的物质。 实验推论： 2 端粒酶的结构 1987年，Blackburn 柱层析 RNP结构 四膜虫端粒酶RNP 含有RNA组分和蛋白质组分，两者均为酶活性所必需。对RNA酶极为敏感。 RNA组分 Protein CAACCCCAA CAACCCCAA 端粒酶RNA 1）CAACCCCAA结构，有碱基修饰。 2）反义RNA封闭，能抑制酶活性。 反义RNA 3）Greider的点突变实验： 点突变 端粒酶RNA序列 C A 端粒 端粒酶 A A