手顺书例-日本造血细胞移植学会.doc

　自家?同種末梢血幹細胞凍結保存　作業手順書（例）　 ＜処理前＞ 作業内容 チェック 造血細胞処理工程記録に患者名、ID、PBSC採取をした担当者、処理担当者、検査担当者を記録する ＜処理作業＞ 番号 作業内容 チェック 1-1 PBSC採取バックから有核細胞数算定およびCD34陽性細胞測定用サンプルを無菌的に採取する。 1-2 検査担当者に引き渡す。 2-1 採取幹細胞液量、処理開始年月日時間、CP-1 Lot番号、25%アルブミンLot番号などを記録する。 2-2 印刷されたラベルがある場合にはそれを添付しておく。 3-1 CP-1(100mL用)を専用保冷容器（4℃）に入れ十分冷やしておく。 3-2 上記のCP-1に、50mLシリンジで25%アルブミン32mLをゆっくり混和しながら加え合計100mLにする。アルブミンを加えた後に、CP-1容器の重量を量り記録する（通常、アルブミン添加後の重量はグロスで181g)。そのまま専用保冷容器（4℃）で保管する。 4-1 凍結バッグに患者（ドナー）名、採取（処理）年月日、製剤名、診療科名、製剤番号を記載する。印刷されたラベルがある場合にはそれを添付する。 4-2 作業記録に製剤番号（複数の場合はそれぞれ）を記録する。 5-1 採取バッグに凍結バッグを接続する。 5-2 採取バッグ内の幹細胞浮遊液量を50mLシリンジで計量し、記録する。 5-3 採取幹細胞浮遊液が100mLに足りない場合にはヘパリン2mL加RPMI液を加えて計102mLとする。ヘパリンとRPMI液を使用した場合にはLot番号を記録する。 6-1 細胞浮遊液が入っている凍結バッグを4℃保冷剤で包み、アルブミン加CP-1 液を凍結バッグラインから50mLシリンジを用いて凍結バックにゆっくり混和しながら加える。（必要に応じて末梢血幹細胞液は複数の凍結バッグに分ける） 6-2 注入後は凍結バックから気泡を除去する。 7-1 2本の凍結サンプルチューブに所属、日付、氏名、サンプル番号を記録する。 7-2 工程記録に凍結サンプルNoをそれぞれ記録する。 7-3 凍結用サンプルを採取し、量を記録する。 7-4 幹細胞液入り凍結バッグをチューブシーラーにてシールし、切り離す。 7-5 サンプル採取後の凍結本体液量を記録する。 8-1 処理終了年月日時間を記録する。 ＜凍結保存作業＞ 番号 作業内容 チェック 9-1 幹細胞液入り凍結バッグを規定のアルミキャニスターに入れる。 9-2 凍結サンプルもできるだけ同一条件になるようにする（同一凍結速度になるような凍結容器を使用する）。 9-3 -80℃以下のディープフリーザーで凍結を開始する。 （プログラムフリーザーを用いる場合は、本体?凍結サンプルを庫内に入れ、適切な条件で凍結を開始する。） 10-1 凍結開始年月日時間を記録する。 10-2 本体保管場所、サンプル保管場所、および凍結作業者氏名を記録する。 （本体?サンプルが複数の場合はそれぞれ記録する。） 　自家?同種末梢血幹細胞凍結保存　作業記録　 ＜処理前＞ 患者所属 ドナー所属 PBSC採取担当者 患者氏名 ドナー氏名 処理担当者 患者ID ドナーID 凍結担当者 患者体重 ドナー体重 検査担当者 ＜処理作業＞ 手順書番号 記録項目 記録 備考 1-1 処理前サンプル採取量 mL 2-1 採取幹細胞液量 mL 処理開始年月日時間 CP-1 Lot番号 25%アルブミンLot番号 3-2 25%アルブミン量 mL 4-2 1）製剤番号 2）製剤番号 5-2 幹細胞浮遊液量 mL 5-3 ヘパリン加RPMI液量 mL ヘパリンLot番号 RPMI Lot番号 7-2 1）凍結サンプル番号 2）凍結サンプル番号 7-3 1）凍結サンプル量 mL 2）凍結サンプル量 mL 7-5 凍結本体液量 mL 全有核細胞数 x 10 9個 x 10 9個/kg(患者) 全CD34陽性細胞数 x 106個 x 106個/kg(患者) 8-1 処理終了年月日時間 ＜凍結保存作業＞ 10-1 凍結開始年月日時間 10-2 本体保管場所　1） 本体保管場所　2） サンプル保管場所　1） サンプル保管場所　2） 　骨髄液からの赤血球除去（スペクトラを用いた場合）　作業手順書（例）　 ＜処理前＞ 患者所属 ドナー所属 患者氏名 ドナー氏名 患者ID ドナーID 処理開始年月日時間 処理担当者 処理責任者 番号 作業内容 チェック 1-1 赤血球量が160mL未満の場合には、ドナーと同型のRCC-LRをバッグに加え赤血球量を160mL以上とする。 1-2 必要な機器と器材 ①　COBE　Spectra　 ②　シングルステージフィラー（白血球用） ③　無菌接