微生物的培养和应用(3).docVIP

PAGE PAGE 3 学习内容： 分解纤维素的微生物的分离 学习目标：进行微生物的分离和培养；测定某种微生物的数量； 课前导学： 1．纤维素是 类物质， 是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。 2．纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即 、 和 ，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成 。正是在这三种酶的协同作用下，纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长提供营养，同样，也可以为人类所利用。 3．筛选纤维素分解菌可以用 法，这种方法能够通过 直接对微生物进行筛选。原理是：刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以 为中心的透明圈，我们可以通过是否产生 来筛选纤维素分解菌。 4．在土壤中取样的方法有：① ；② 。 5．刚果红是一种 ，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。 6．分离分解纤维素的微生物的实验流程图如下： → →梯度稀释→ → 。 纤维素分解菌大多分布在富含 的环境中。纤维素分解菌选择培养基属于液体培养基，原因是没有添加 成分。 7. “刚果红染色法”:比较两种染色法的各自的优缺点 染色法 优点 缺点 方法一 颜色反应基本上是 纤维素分解菌的作用 操作繁琐 刚果红会使菌落之间发生混杂 方法二 操作简便 不存在菌落混杂问题 产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈， 有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。 8.为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行 实验，纤维素酶的发酵方法有 液体 发酵和 固体 发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的 含量进行定量测定。 例题精讲： 1.微生物与人类关系密切，虽然有些微生物能使动植物患病，但多数微生物对人类是有益的，请回答下列有关问题。 ⑴下表为两种微生物的培养基配方。 A培养基 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 1.4 g 2.1 g 0.2 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g B培养基 纤维素粉 NaNO3 Na2HPO4 KH2PO4 MgSO4·7H2O KCl 酵母膏 琼脂 5 g 1 g 1.2 g 0.9 g 0.5 g 0.5 g 0. 15.0g 上述两种培养基中的物质溶解后，均用蒸馏水定容到1 000 mL。 ⑴为检验纤维素分解菌的存在与否还应加入__________，将呈______反应。在纤维素分解菌的周围会出现____________。 ⑵微生物接种的方法很多，平板划线法操作结束时，为什么仍需要灼烧接种环？________________________________________________。 ⑶微生物培养过程中还有什么方法或步骤要防止其他微生物污染？_________________ ______________________________。 ⑷B培养基配制的顺序是_____________________(填序号)。 ①称量 ②溶化 ③计算 ④调pH ⑤灭菌 ⑥倒平板 ⑸该实验使用过的培养基及其培养物必须经过＿＿＿处理后才能丢弃，以防止培养物的扩 散。 反馈矫正： 下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是 （ ） A.植物组织培养常用的是固体培养基 B.可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型 C.利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌 D.在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌 2.微生物（除病毒外）需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列有关微生物营养的说法正确的是 （ ） A．乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的 B．微生物生长中不可缺少的一些微量的无机物称为生长因子 C．培养基中的营养物质浓度越高对微生物