宽体金线蛭与菲牛蛭抗凝血酶活性及抗凝机制比较研究-中国药师.pdf

中国药师　　２０１６年第１９卷第９期　　ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｉｓｔ２０１６，Ｖｏｌ．１９　Ｎｏ．０９ ·研究论文 · 宽体金线蛭与菲牛蛭抗凝血酶活性及抗凝机制比较研究 丁月珠　段天璇　单宇　王雄飞　杨欢　袁瑞娟　 （北京中医药大学中药学院　北京１００１０２） 摘　要　目的：比较宽体金线蛭和菲牛蛭抗凝血酶活性及对凝血途径的影响，为进一步揭示水蛭抗凝作用机制提供参考。方 法：采用凝血酶滴定法、发色底物法萃取ＨＰＬＣ联合法测定水蛭对凝血酶的作用；同时采用凝固法测定其活化部分凝血活酶 时间（ＡＰＴＴ）、凝血酶原时间（ＰＴ）和凝血酶时间（ＴＴ），比较宽体金线蛭与菲牛蛭对不同凝血途径的影响。结果：凝血酶滴定 法的结果表明，不同水蛭的抗凝活性顺序依次为：菲牛蛭活体冻干品＞菲牛蛭清水吊干品＞＞宽体金线蛭清水吊干品；发色 底物法萃取ＨＰＬＣ法测定不同水蛭对凝血酶抑制作用的结果表明：不同水蛭水提取物对凝血酶的作用均表现出低浓度促进， 高浓度抑制，且菲牛蛭具有强烈凝血酶抑制活性，而宽体金线蛭在加入更高剂量时才表现出抑制作用，且抑制作用较弱，菲牛 蛭的抗凝血酶活性远远高于宽体金线蛭；不同水蛭样品均使ＡＰＴＴ、ＰＴ、ＴＴ延长，但是菲牛蛭活体冻干品主要延长ＴＴ，清水吊 干品主要延长ＡＰＴＴ，而宽体金线蛭使ＡＰＴＴ、ＴＴ延长更加显著。结论：宽体金线蛭和菲牛蛭对凝血酶及凝血途径的作用很大 区别。 关键词　 宽体金线蛭；菲牛蛭；抗凝血酶活性；凝血途径 中图分类号：Ｒ２８５．５　文献标识码：Ａ　　文章编号：１００８０４９Ｘ（２０１６）０９１６２１０４ ＣｏｍｐａｒａｔｉｖｅＳｔｕｄｉｅｓｏｎＡｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎＡｃｔｉｖｉｔｙａｎｄＡｎｔｉｃｏａｇｕｌａｎｔＭｅｃｈａｎｉｓｍｂｅｔｗｅｅｎＷｈｉｔｍａｎｉａＰｉｇｒａ ＷｈｉｔｍａｎａｎｄＨｉｒｕｄｉｎａｒｉａＭａｎｉｌｌｅｎｓｉｓ ＤｉｎｇＹｕｅｚｈｕ，ＤｕａｎＴｉａｎｘｕａｎ，ＳｈａｎＹｕ，ＷａｎｇＸｉｏｎｇｆｅｉ，ＹａｎｇＨｕａｎ，ＹｕａｎＲｕｉｊｕａｎ（ＳｃｈｏｏｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ，ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉ ｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１０２，Ｃｈｉｎａ） ＡＢＳＴＲＡＣＴ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｎｔｈｅｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎｐａｔｈｗａｙｂｅｔｗｅｅｎＷｈｉｔｍａｎｉａｐｉｇｒａ ＷｈｉｔｍａｎａｎｄＨｉｒｕｄｉｎａｒｉａｍａｎｉｌｌｅｎｓｉｓｔｏｐｒｏｖｉｄｅｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｒｅｖｅｌａｔｉｏｎｆｏｒＨｉｒｕｄｏ．Ｍｅｔｈｏｄｓ： ＡｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎｔｉｔｒａｔｉｏｎａｎｄｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｓｕｂｓｔｒａｔｅａｓｓａｙｅｘｔｒａｃｔｉｏｎＨＰＬＣｗｅｒｅａｐｐｌｉｅｄｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＷｈｉｔｍａｎｉａ ｐｉｇｒａＷｈｉｔｍａｎａｎｄＨｉｒｕｄｉｎａｒｉａｍａｎｉｌｌｅｎｓｉｓ．ＡＰＴＴ，ＰＴａｎｄＴＴｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙａｃｌｏｔｔｉｎｇａｓｓａｙｔｏｃｏｍｐａｒｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｎｔｈｅｐａｔｈ ｗａｙｏｆｂｌｏｏｄｃｌｏｔｔｉｎｇ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＴｈｅａｎｔｉｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎａｃｔｉｖｉｔｙｏｒｄｅｒｍｅａｓｕｒｅｄｂｙａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎｔｉｔｒａｔｉｏｎｗａｓｌｉｖｉｎｇＨｉｒｕｄｉｎａｒｉａｍａｎｉｌｌｅｎｓｉｓ ＞ｄｒｉｅｄＨｉｒｕｄｉｎａｒｉａｍａｎｉｌｌｅｎｓｉｓ＞＞ｄｒｉｅｄＷｈｉｔｍａｎｉａｐｉｇｒａＷｈｉｔｍａｎ．ＴｈｅｒｅｓｕｌｔｓｏｆｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｓｕｂｓｔｒａｔｅａｓｓａｙｅｘｔｒａｃｔｉｏｎＨＰＬＣｉｎ ｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｌｏｗｄｏｓｅｏｆａｑｕｅｏｕｓｅｘｔｒａｃｔｐｒｏｍｏｔｅｄｔｈｅｔｈｒｏｍｂｉｎａｃｔｉｖｉｔｙ，ｗｈｉｌｅｔｈｅｈｉｇｈｄｏｓｅｉｎｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅｔｈｒｏｍｂｉｎａｃｔｉｖｉｔｙ．Ｈｉｒｕｄｉ ｎａｒｉａｍａｎｉｌｌｅｎｓｉｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｅｄｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｒｏｍｂｉｎ，ｗｈｉｌｅＷｈｉｔｍａｎｉａｐｉｇｒａＷｈｉｔｍａｎｓｈｏｗｅｄｗｅａｋａｎｔｉｔｈｒｏｍｂｉｎａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｎｌｙａｔｔｈｅｈｉｇ