甜高粱教材茎秆固态发酵生产燃料乙醇探究.pdfVIP

甜高粱茎秆固态发酵生产燃料乙醇研究 康利平，刘莉，刘萍，孙君社＊ 中国农业大学食品科学与营养工程学院，北京 (100083 ） anly29519@163.com 摘 要：本文通过研究甜高粱茎秆M-81E 固态发酵生产燃料乙醇的主要影响因素，确定最优 发酵条件为：耐高温酿酒酵母接种量为 3 ％，发酵初始基质水分含量为76% ，添加 0.25 ％ CaCl ，0.25 ％MgSO 7H O ，40 ℃发酵24 h ，乙醇得率为6.42 g/100g甜高粱茎秆，转化率为 2 4· 2 90.5% ，残糖含量低于0.3%；添加10 FPU/g纤维素酶和10 CBU/g β-葡萄糖苷酶，进行同步 糖化固态发酵，乙醇得率为7.53 g/100g甜高粱茎秆，与不添加纤维素酶和β-葡萄糖苷酶的相 比，乙醇得率提高了14.6%。 关键词：甜高粱茎秆；固态发酵；燃料乙醇 中图分类号：S216.2 1 引言 甜高粱（Sorghum bicolor Moench. L. ），又称糖高粱、芦粟或甜秆，既是一种粮食作物、 糖料作物，又是能源作物。每亩甜高粱产4000~5000 Kg富含糖分和纤维的茎秆，200~500 Kg [1] [2] 的粮食籽粒 ，其中70-80% 的干重组分可被利用生产燃料乙醇 。随着国家对粮食燃料乙 醇的限制，发展甜高粱燃料乙醇是发展清洁生物能源的重要要途径。 固态发酵具有能耗小，产物浓度高，产生废水少，运作费用低等优点[3] 。而目前国内外 对甜高粱固态发酵生产燃料乙醇的研究仍比较少，Mamma[4]等人利用Fusarium oxysporum和 Saccharomyces cerevisiae混菌糖化发酵甜高粱茎秆，利用Fusarium oxysporum产酶水解纤维素 和半纤维素等不可溶性糖，其发酵周期较长；Bryan[5]对未灭菌甜高粱茎秆进行自然固态发 酵，副产物较多；宋俊萍[6]等对甜高粱茎秆直接粉碎固态发酵条件进行了研究。本文通过对 甜高粱茎秆M-81E粉碎后固态发酵条件进行摸索的同时，还探索了纤维素酶对甜高粱茎秆固 态发酵的作用，充分利用甜高粱茎秆中的可溶性糖和部分纤维素发酵生产燃料乙醇，提高乙 醇得率。 2 材料与方法 2.1 实验材料 甜高粱茎秆：品种 M-81E ，产地滨州，由山东滨州光华生物能源有限公司提供，2006 年5 月种植，10 月收割，生长期为150 天。新鲜甜高粱茎秆中水分含量72.80%，总糖含量 13.92%，粗纤维含量9.61% 。 耐高温酿酒酵母：中国农业大学发酵工程实验室保存菌种。 纤维素酶：湖南尤特尔生化有限公司提供。其中滤纸酶活200 FPU/g ，β-葡萄糖苷酶酶 活69 CBU/g 。 Novozym 188 ：Sigma 公司购买，其中β-葡萄糖苷酶酶活301 CBU/L 。 斜面保藏培养基：2% 葡萄糖，1% 酵母膏，2% 蛋白胨，0.2% KH2PO4 ，0.1% MgSO ·7H O，自然pH值，121℃，灭菌15 min。 4 2 种子活化培养基：2% 葡萄糖，1% 酵母膏，2% 蛋白胨, 自然pH 值，121℃，灭菌15 min。 - 1 - 2.2 实验方法 2.2.1 固态发酵 将甜高粱茎秆粉碎至粒度大小0.1-0.3 cm 。于121℃，灭菌15 min。接入培养18 h 的种 子培养基，根据发酵条件进行调节，塞上发酵栓，静止发酵。实验设置两个重复。 2.2.2 水分含量测定 将粉碎后甜高粱茎秆于60℃烘箱中风干至恒重。根据质量差值计算得出水分含量。 2.2.3 甜高粱茎秆糖分测定 粉碎后甜高粱茎秆用75 ％ 乙醇，150 w 超声波50℃分次浸提4