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- 2019-07-13 发布于江苏
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[最新考纲] 1.基因工程的诞生(Ⅰ) 2.基因工程的原理及技术(含PCR技术)(Ⅱ) 3.基因工程的应用(Ⅱ) 4.蛋白质工程(Ⅰ) 1.基因工程的基本工具 (1)两种工具酶:限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶。限制性核酸内切酶主要从原核生物中提取,具有专一性,使特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。 (2)一种运输工具:载体。 ①载体的种类:质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 ②四个条件:能够自我复制、有多个限制酶切割位点、具有标记基因、对受体细胞无伤害。 2.基因工程的基本操作程序的四个主要步骤 目的基因的获取→基因表达载体的构建→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定。 (1)基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。 (2)目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。 (3)目的基因导入动物细胞的方法是显微注射法,常用的受体细胞是受精卵。 (4)目的基因的获取与检测 ①三种获取方法:基因文库直接获得、PCR扩增、人工合成。 ②四种检测方法:DNA分子杂交、DNA—mRNA分子杂交、抗原—抗体杂交、个体生物学水平的抗性检测。 3.蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质。 [课前导学] 1.基因工程的概念 2.基因工程的基本操作工具 【答案】原核生物 磷酸二酯键 黏性末端 磷酸二酯键
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