海绵中氯丙酸脱氯微生物的分离及其初步研究.pdf

第29卷第3期 水 产 科 学 V01．29NO．3 2010年3月 FISHERlESSCIENCE Mar．2010 海绵中氯丙酸脱氯微生物的分离及其初步研究 黄剑宇1’2，信艳娟1’2，张卫1 (1．中国科学院大连化学物理研究所海洋生物产品工程组，辽宁大连116023； 2．中国科学院研究生院，北京100049) 摘要：以氯丙酸为单一碳源．通过富集培养从大连海域繁茂膜海绵中分离筛选得到139株氯丙酸降 解菌。经过初步筛选得到35株降解能力较强的菌株。对这些菌株的耐盐试验表明，分离到的大部分 菌株均具有较强的盐耐受能力，多数菌株为中度嗜盐菌。其中部分菌株可以在14．6％以上盐度培养基 中生长，可能为极端嗜盐菌。多底物降解试验表明，大多数菌株均能降解多种底物。这些菌株可用于有 机氯污染环境生物修复。同时也说明海绵对水体中有机氯污染物具有去除作用。 关键词：氯丙酸降解；富集培养；中度嗜盐菌；海绵微生物 中图分类号：Q939．9 文献标识码：A 文章编号：】003-1儿1f20lo)03-0166-06 有机氯化物是环境中广泛存在的一类有机污 物，体内有着复杂的水沟系统，在这些水沟系统中 染物，由于陆地环境中大量的有机氯污染物随地表 富集有大量的海洋微生物[5]。笔者以有机氯污染 径流流入以及生活污水、含氯工业废水的不当排 严重且富营养化程度高的大连凌水河口海域的繁 放，使海洋环境中也积累了大量的外源有机氯污染 茂膜海绵(Hymeniacidonperlevie)为对象，分离筛 物。同时海洋中很多海藻、海洋动物、微生物也可 选氯丙酸降解微生物，并对这些脱氯微生物的耐盐 以产生多种多样的有机氯化物口]。越来越严重的 能力和在不同盐度下的降解能力进行了初步研究。 有机氯污染在给海洋动植物带来了危害的同时，也 1材料与方法 逐渐威胁到人类的生活安全，近年来海洋有机氯污 染防护、海洋有机氯的生物降解得到了人们的广泛 1．1试验材料 关注。但与陆地环境中的相关研究相比，对海洋环 1．1．1海绵样品 境中有机氯化物微生物降解的研究还刚刚开始。 繁茂膜海绵活体样本采自于大连黑石礁凌水 相关研究表明，海洋微生物是海底沉积的有机氯化 桥附近海域潮间带。海绵种属鉴定由中国科学院 物的主要分解者，在海洋有机氯降解中起着重要的 海洋研究所鉴定为：寻常海绵纲、软海绵目、膜海绵 作用[2]。海洋中的多氯联苯、多种有机氯农药、氯 科、繁茂膜海绵。 苯酚等芳香族有机氯化物、二睬英等难降解有机氯 1．1．2培养基组成 均可被海洋微生物降解或部分降解[3]。 1．1．2．12216E培养基 有机氯化物降解的关键步骤是C-C1键的断 蛋白胨5．0g／L、酵母浸粉1．0g／L、FeCl。0．1 30 L，加1N g／L、NaClg／L，加去离子水溶解至1 裂，这一步骤在微生物中是由脱氯酶(Dehaloge- nase)催化进行的。2一卤代酸脱卤酶催化2一卤代酸 降解产生2一羟基酸和氯离子，这一反应最早发现于 min，固体培养基需加入20g／L的琼脂粉。 环境微生物对2一卤代烷烃和2—2氯丙酸(一种农业 1．1-2．2不同盐度2216E固体培养基 除草剂)的降解过程中。氯丙酸有毒，在海水中会 改变2216E固体培养基中NaCl的含量，分别 对海洋动物产生毒害作用，较高浓度的氯丙酸污染